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酵母雙雜交系統(tǒng)是一種鑒定蛋白質(zhì)相互作用的研究方法,是基于對酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4的性質(zhì)研究之上。GAL4包括兩個功能結(jié)構(gòu)域:一是與DNA上游激活序列(Upstream activating sequence UAS)結(jié)合的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域(binding domain, BD), 該結(jié)構(gòu)域位于N端1-174位氨基酸殘基區(qū)段;另一個是轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域(activation domain, AD),該結(jié)構(gòu)域位于C端768-881位氨基酸殘基區(qū)段。這兩個功能結(jié)構(gòu)域是兩個結(jié)構(gòu)相互分離,功能又相互獨立。一般情況下,單獨的BD可以和UAS結(jié)合但并不引起轉(zhuǎn)錄,單獨的AD則不能與UAS結(jié)合,只有當BD與AD分別表達的融合蛋白由于相互作用而導(dǎo)致兩者在物理空間上相互接近時,BD與AD才能與UAS結(jié)合從而引起啟動子下游基因的轉(zhuǎn)錄。

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?酵母雙雜交主要功能?
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發(fā)現(xiàn)新的與已知蛋白質(zhì)互作的蛋白質(zhì);
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§?
確認兩個蛋白質(zhì)之間的相互作用;
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鑒定參與蛋白質(zhì)相互作用的區(qū)域;
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?酵母雙雜交技術(shù)優(yōu)勢?
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真實:蛋白質(zhì)互作發(fā)生在酵母細胞內(nèi),反應(yīng)互作真實水平;
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靈敏:可檢測微弱和短暫的蛋白質(zhì)互作作用;
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操作簡單:無需蛋白質(zhì)抽提、純化等繁瑣步驟;
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通量大,可構(gòu)建文庫,一次性完成數(shù)萬蛋白質(zhì)相互作用的篩選;
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§?
結(jié)果直觀:通過藍白斑篩選可以直觀地找出有互作蛋白的陽性克隆。
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?酵母雙雜交定制服務(wù)?
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文庫構(gòu)建(周期:4-6周)
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項目流程:

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樣本選擇:
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樣品類型 |
樣品需求 |
保存條件(℃) |
運輸條件 |
備注 |
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動物組織 |
>?0.5?g |
-80 |
干冰 |
樣本需標準清楚名稱,分類等唯一信息。 |
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貼壁/懸浮細胞 |
>1*?107細胞 |
-80 |
干冰 |
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種子 |
>?1g |
-80 |
干冰 |
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植物組織 |
>?1g |
-80 |
干冰 |
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交付標準:
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產(chǎn)品名稱 |
交付標準 |
儲存條件 |
備注 |
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酵母工作液甘油菌 |
>100管(1?m/管) |
-80?℃ |
? |
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篩選用載體套裝 |
1套 |
-20?℃ |
擴繁保存 |
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篩庫用酵母菌株甘油菌 |
1套 |
-80?℃ |
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建庫項目報告 |
1份 |
- |
? |
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文庫篩選(周期:4-6周)
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項目流程:

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交付標準:
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產(chǎn)品名稱 |
交付標準 |
儲存條件 |
備注 |
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構(gòu)建好的BD載體 |
1管 |
-20?℃ |
公司構(gòu)建 |
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陽性克隆酵母菌液 |
根據(jù)具體項目結(jié)果進行交付 |
-80?℃ |
? |
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陽性克隆質(zhì)粒 |
根據(jù)具體項目結(jié)果進行交付 |
-20?℃ |
? |
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篩選項目報告 |
1份 |
-- |
? |
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互作驗證(周期:2-3周)
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項目流程:
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交付標準:
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產(chǎn)品名稱 |
交付標準 |
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驗證結(jié)果報告 |
1份 |
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?翌圣酵母雙雜定制服務(wù)-技術(shù)優(yōu)勢?
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利用mRNA來建庫。采取總RNA純化出mRNA的方式來建庫,排除了樣本中的核糖體RNA的污染,增加了篩選樣本的有效性;大多數(shù)公司是采用總RNA來擴增建庫的;
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·?
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實驗設(shè)計嚴謹,保證陽性率。全程設(shè)置了嚴格的陽性對照,過程控制達到陽性對照的標準才會繼續(xù)往下實驗,如果建庫過程達不到陽性對照水平是不收取建庫的費用的。在篩選的過程中,同時采用了從松弛型篩選到嚴謹型篩選和從嚴謹型篩選到松弛型篩選兩條路線盡最大的可能保證篩選到陽性結(jié)果。
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·?
團隊經(jīng)驗豐富。研發(fā)團隊成員深耕酵母雜交技術(shù)領(lǐng)域十多年,擁有豐富的篩選經(jīng)驗;
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售前售中高效響應(yīng)。每個項目,由專業(yè)技術(shù)支持全程跟進,及時對接項目進度及解答售前問題;
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貼心售后。贈送配套的篩庫載體菌株、篩庫完整方案和售后指導(dǎo)。根據(jù)客戶要求,提供CNS文章級別的結(jié)果圖片。
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?相關(guān)產(chǎn)品上新?
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
價格 |
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酵母質(zhì)粒提取試劑盒 |
50T/100T |
300/520 |
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核蛋白酵母雙雜交試劑盒 |
4T |
8775 |
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上新優(yōu)惠活動
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定制服務(wù):活動期間,訂購翌圣酵母雙雜定制服務(wù),即送訂單金額×5%的酵母質(zhì)粒提取試劑盒(70201ES)或相關(guān)分子試劑;
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核蛋白酵母雙雜交建庫試劑盒(70202ES):活動期間,訂購該產(chǎn)品可享目錄價8折,再送50T 酵母質(zhì)粒提取試劑盒(70202ES)。
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活動時間:即日起至2023年12月31日。
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※該活動所有解釋權(quán)歸翌圣生物科技(上海)股份有限公司所有。
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?相關(guān)產(chǎn)品推薦?
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產(chǎn)品名稱 |
貨號 |
產(chǎn)品定位 |
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TRIeasy??LS Total RNA Extraction Reagent 液體總RNA提取試劑(同TRIzol LS) |
RNA提取 |
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MolPure??TRIeasy Plus Total RNA Kit ??總RNA提取試劑盒(帶離心柱) |
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MolPure??Cell/Tissue Total RNA Kit ?細胞/組織總RNA提取試劑盒 |
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MolPure??Plant RNA Kit ?植物RNA提取試劑盒 |
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MolPure??Plant Plus RNA Kit ?多糖多酚植物RNA提取試劑盒 |
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MolPure??Bacterial RNA Kit 細菌RNA提取試劑盒 |
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MolPure??Viral DNA/RNA Kit 病毒DNA/RNA提取試劑盒 |
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X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷 |
篩選底物 |
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Aureobasidin A(AbA) 金擔子素A |
篩選抗生素 |
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