TissueFAXS Cytometry技術(shù)——組織原位輔助疫苗研發(fā)的新策略-技術(shù)前沿-資訊-生物在線

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TissueFAXS Cytometry技術(shù)——組織原位輔助疫苗研發(fā)的新策略

作者:TG亞太公司 2022-10-28T10:33 (訪問量:11394)

414日,我國兩款新冠病毒滅活疫苗獲得國家藥品監(jiān)督管理局一二期合并的臨床試驗許可,相關(guān)臨床試驗同步啟動。這是首批獲得臨床研究批件的新冠病毒滅活疫苗。此前,軍事科學(xué)院軍事醫(yī)學(xué)研究院腺病毒載體疫苗已獲批開展臨床試驗。全球科學(xué)家都在積極研發(fā)針對新型冠狀病毒的疫苗以及新冠肺炎藥物,已經(jīng)有部分研究進(jìn)入動物及臨床實驗階段,這也是藥物和疫苗大規(guī)模用于臨床的必經(jīng)之路。動物實驗在研究病毒感染和發(fā)病機(jī)理、傳播途徑及藥物和疫苗評價中發(fā)揮著重要作用。

在疫苗安全性評價方面,需要評估不同劑量組及陽性、陰性對照組中實驗動物不同器官的損傷程度,在以往評估過程中,往往需借助病理科醫(yī)生來判斷,由于判斷標(biāo)準(zhǔn)不一,存在一定的主觀性差異。運用TG組織原位定量分析技術(shù),可對病理組織樣本進(jìn)行單細(xì)胞、組織結(jié)構(gòu)、空間分布等多個層面的損傷程度定量分析。

另外,在此過程中需制備大量病理組織切片,TG系統(tǒng)具備高通量切片上樣系統(tǒng),可實現(xiàn)上百張切片的連續(xù)掃描和定量分析,通過高通量自動化的成像和分析技術(shù),構(gòu)建大數(shù)據(jù)疫苗安全性評價方案。


那么,TG又在動物實驗組織層面上做過哪些研究呢?

如下列出TG與疫苗研究相關(guān)文章節(jié)選:

Mucosal ImmunologyFc受體介導(dǎo)的組織吞噬作用是HIV疫苗防治策略的有效機(jī)制


開發(fā)出具有完全保護(hù)性的HIV疫苗是HIV研究的最終目標(biāo)。但迄今為止,在III期臨床試驗中RV144是唯一經(jīng)過檢測可以降低HIV感染率的疫苗。在RV144試驗中獲得的31%感染防護(hù)與非中和抗體(viralnon-neutralizableantibody)的誘導(dǎo)有關(guān),該抗體能夠介導(dǎo)抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(ADCC),也表明了Fc的介導(dǎo)功能在感染防護(hù)中起著重要作用。
已有相關(guān)文章證實抗體的Fc片斷介導(dǎo)了抗病毒活性,但是組織層面,其預(yù)防感染或感染后的Fc效應(yīng)機(jī)制仍然是未知的。馬薩諸塞州總醫(yī)院拉貢研究所、麻省理工學(xué)院和哈佛大學(xué)的研究人員在女性生殖系統(tǒng)和胃腸道黏膜中發(fā)現(xiàn)了很容易被忽略的表達(dá)Fc受體的自然殺傷細(xì)胞,確定易損組織中存在的效應(yīng)細(xì)胞和Fc受體。
VRC01抗體Fc結(jié)構(gòu)域的修飾增加了兩種吞噬細(xì)胞的吞噬反應(yīng)。實驗表明,非ADCC介導(dǎo)的機(jī)制,如吞噬作用和嗜中性粒細(xì)胞活化,更可能在預(yù)防性疫苗或消除病毒儲存庫的治療方法中發(fā)揮作用。

文章中使用TissueFAXS掃描軟件獲取到全景圖像后,再利用針對熒光樣本的細(xì)胞水平分析軟件TissueQuest,對HIV感染組織樣本中Fc效應(yīng)表達(dá)的先天免疫細(xì)胞變化進(jìn)行定量。

aCD32+巨噬細(xì)胞的結(jié)腸免疫熒光樣本

bCD32+巨噬細(xì)胞的淋巴結(jié)免疫熒光樣本

cCD16+中性粒細(xì)胞結(jié)腸免疫熒光樣本

dCD16+中性粒細(xì)胞淋巴結(jié)免疫熒光樣本

e,fHIV感染不同階段患者回腸和腹股溝淋巴結(jié)樣本巨噬細(xì)胞定量分析

g,h) HIV感染不同階段患者回腸和腹股溝淋巴結(jié)樣本中性粒細(xì)胞定量分析

i,jHIV感染淋巴結(jié)中中性粒細(xì)胞向T細(xì)胞區(qū)和B細(xì)胞濾泡的浸潤

k)急性、早期和慢性感染者淋巴結(jié)中性粒細(xì)胞密度與CD4數(shù)量關(guān)系

l)直腸活檢中巨噬細(xì)胞密度與外周病毒載量呈負(fù)相關(guān)


CELL: 新的HIV疫苗遞送策略可增強(qiáng)保護(hù)性的免疫反應(yīng)

生發(fā)中心(germinal centers, GC)是短暫存在的微觀結(jié)構(gòu),它們在免疫反應(yīng)期間形成淋巴器官。生發(fā)中心含有活化B細(xì)胞、特殊的濾泡輔助性T細(xì)胞(TFH)和捕獲抗原的濾泡樹突細(xì)胞。由于B細(xì)胞免疫優(yōu)勢和生發(fā)中心(GC)的數(shù)量和質(zhì)量等免疫障礙的存在,傳統(tǒng)的疫苗免疫策略難以誘發(fā)針對艾滋病毒或其他難研究病原體的廣譜中和抗體(bnAb)。

來自美國斯克利普斯研究所、拉喬拉免疫學(xué)研究所和加州圣迭戈大學(xué)等研究機(jī)構(gòu)的研究人員發(fā)現(xiàn)了一種新的HIV疫苗遞送策略似乎在臨床前模型中增強(qiáng)保護(hù)性的免疫反應(yīng):連續(xù)幾天小劑量接種HIV疫苗要比一次性接種全部劑量的相同疫苗誘導(dǎo)更強(qiáng)的免疫反應(yīng)。

研究發(fā)現(xiàn),兩種獨立的恒河猴(RMs) 慢速免疫策略可以誘導(dǎo)更強(qiáng)大的輔助性濾泡T細(xì)胞(TFH細(xì)胞)的細(xì)胞反應(yīng)以及更好的結(jié)合enc的生發(fā)中心B細(xì)胞反應(yīng)。傳統(tǒng)的疫苗免疫策略免疫動物以免疫優(yōu)勢非中和表位為靶點,而另外兩種慢速免疫策略的表位靶點更為多樣化。通過改變免疫策略可以GCs和調(diào)節(jié)非中和表位的免疫優(yōu)勢來促進(jìn)nAb的產(chǎn)生。


其中在熒光樣本成像中應(yīng)用TissueFAXS SL Q+ 2D/3D多維組織細(xì)胞定量分析系統(tǒng),在組織學(xué)水平共聚焦層面獲得大批量高清圖像樣本,系統(tǒng)從全景成像角度出發(fā),目的在于獲得樣本整體單細(xì)胞、特定結(jié)構(gòu)、空間位置關(guān)系等整體數(shù)據(jù)結(jié)果分析。不僅可以獲得Env、cd35Ki67的共定位圖像,甚至可以從單通道進(jìn)行組織原位分子量化分析及不同通道之間共定位及空間分布情況。


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