DNA或RNA鏈上堿基的苯環結構在紫光區具有較強吸收，其吸收峰在260nm處。波長為260nm時，DNA或RNA的光密度OD260不僅與總含量有關，也隨構型而有差異。
對標準樣品來說，濃度為1μg/ml時，DNA鈉鹽的OD260＝0.02。當OD260＝1時，DNA濃度約為50μg/ml；RNA濃度約為40μg/ml；寡核苷酸濃度約為33μg/ml。
當DNA樣品中含有蛋白質、酚或其他小分子污染物時，會影響DNA吸光度的準確測定。一般情況下同時檢測同一樣品的OD260、OD280和OD230，計算其比值來衡量樣品的純度。
核酸純度判定（經驗值）：
純DNA：OD260/OD280≈1.8(＞1.9,表明有RNA污染；＜1.6，表明有蛋白質、酚等污染）
純RNA：1.7＜OD260/OD280＜2.0（＜1.7時表明有蛋白質或酚污染；＞2.0時表明可能有異硫*酸殘存）
計算待測樣品的濃度：
DNA樣品的濃度（μg/μl）：OD260×稀釋倍數×50/1000
RNA樣品的濃度（μg/μl）：OD260×稀釋倍數×40/1000
使用Biochrom分光光度計，設定參數后，可實現直接獲取核酸的濃度、OD260/OD280等多個數值，從而對樣品有一個全面的判定。