干細(xì)胞因其自我更新能力和多向分化潛能，在再生醫(yī)學(xué)、藥物篩選和疾病建模中展現(xiàn)出巨大潛力，干細(xì)胞研究的每一次范式革命都始于培養(yǎng)體系的突破，其培養(yǎng)方式直接影響細(xì)胞的質(zhì)量、穩(wěn)定性及臨床應(yīng)用前景。
圖1. 人多能干細(xì)胞 （hPSC） 培養(yǎng)基質(zhì)的演化歷程【1】
干細(xì)胞傳統(tǒng)的黏附培養(yǎng)依賴于小鼠飼養(yǎng)層細(xì)胞，存在異源污染、操作復(fù)雜和可重復(fù)性差等局限性，為解決這些問(wèn)題，以基質(zhì)蛋白為基礎(chǔ)的無(wú)飼養(yǎng)層（Feeder-Free）培養(yǎng)體系應(yīng)運(yùn)而生，如層粘連蛋白（Laminin）、玻連蛋白（Vitronectin）和纖連蛋白（Fibronectin），它們可以有效模擬體內(nèi)微環(huán)境，通過(guò)整合素介導(dǎo)的黏附作用維持干細(xì)胞的貼壁與增殖，為臨床級(jí)干細(xì)胞培養(yǎng)提供更安全、高效、可控的選擇。
層粘連蛋白（Laminin）
層粘連蛋白是一種主要存在于基底膜的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，可以調(diào)節(jié)多能干細(xì)胞的自我更新，分化和多能性。Laminin 521（LN-521）已被證明能夠有效促進(jìn)PSCs的貼附，并通過(guò)與整合素α6β1相互作用維持細(xì)胞的未分化狀態(tài)【2】。此外，LN-521支持PSCs的單細(xì)胞傳代，提高細(xì)胞存活率，并促進(jìn)向特定細(xì)胞類型的分化。
玻連蛋白（Vitronectin）
玻連蛋白是一種細(xì)胞外糖蛋白，可與整合素αvβ5和αvβ1相互作用，促進(jìn)PSCs的貼附和生長(zhǎng)【3】。研究表明，Vitronectin能夠替代基質(zhì)膠（Matrigel），能在不影響 hPSCs 分化潛力的情況下促進(jìn)其增殖超過(guò) 20 次，提供更穩(wěn)定的培養(yǎng)環(huán)境，并減少異源成分的干擾【4】。
纖連蛋白（Fibronectin）
纖連蛋白是廣泛分布的一種大分子量細(xì)胞外糖蛋白，作為干細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)時(shí)，可以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)，提高細(xì)胞貼壁率，促進(jìn)干細(xì)胞的自我更新。Fibronectin 和laminin 可在特定的培養(yǎng)體系中促進(jìn)多能干細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞、胰島細(xì)胞等分化【5，6】，而在PSCs培養(yǎng)中，F(xiàn)ibronectin可以提高細(xì)胞存活率，并增強(qiáng)細(xì)胞的增殖能力【7】。
重組基質(zhì)蛋白培養(yǎng)優(yōu)勢(shì)
細(xì)胞形態(tài)均一
在重組基質(zhì)蛋白（如Laminin-521或Vitronectin）支持下，干細(xì)胞可形成均一、致密的克隆結(jié)構(gòu)，表現(xiàn)出良好的細(xì)胞間連接性【8】。
維持多能性
基質(zhì)蛋白培養(yǎng)方式下的PSCs可高表達(dá)OCT4、SOX2和NANOG等關(guān)鍵標(biāo)志物，維持其未分化狀態(tài)【9】。
高增殖能力
在基質(zhì)蛋白Laminin-521支持下的細(xì)胞增殖水平可與飼養(yǎng)層相媲美，甚至更高【10】。
基因表達(dá)穩(wěn)定
在基質(zhì)蛋白培養(yǎng)條件下，PSCs的基因表達(dá)穩(wěn)定且接近體內(nèi)干細(xì)胞狀態(tài)，且應(yīng)激相關(guān)基因表達(dá)水平較低【11】。
以重組基質(zhì)蛋白（如Laminin-521、Vitronectin等）為基礎(chǔ)的干細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)，在確保細(xì)胞形態(tài)一致性、保持多能性標(biāo)志物表達(dá)、提高擴(kuò)增效率及基因表達(dá)穩(wěn)定性方面展現(xiàn)出明顯優(yōu)勢(shì)，并且?guī)?lái)可重復(fù)性高、無(wú)異源污染風(fēng)險(xiǎn)的安全培養(yǎng)體驗(yàn)。
重組基質(zhì)蛋白
近岸蛋白提供一系列經(jīng)驗(yàn)證的重組基質(zhì)蛋白，滿足不同的干細(xì)胞培養(yǎng)需求！
產(chǎn)品特點(diǎn)
??高純度、高活性、低內(nèi)毒素
??無(wú)異源成分，降低免疫原性風(fēng)險(xiǎn)
??高批間一致性，確保實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性
??提供GMP級(jí)產(chǎn)品，助力客戶IND申報(bào)
產(chǎn)品驗(yàn)證數(shù)據(jù)
高活性重組Vitronectin（GMP）
Measured by its ability to support iPS cell attachment and spreading when used as a substratum for cell culture. The ED50 for this effect is 0.12ug/mL.
高活性重組Laminin521 (GMP)
Measured by its ability to support iPS cell attachment and spreading when used as a substratum for cell culture. The ED50 for this effect is 89 ng/mL.
高活性重組Fibronectin(GMP)
Measured by its ability to support Jurkat cell attachment and spreading when used as a substratum for cell culture.
支持干細(xì)胞穩(wěn)定傳代培養(yǎng)
iPSC分別在Vitronectin、Laminin511和Laminin521的支持培養(yǎng)下，進(jìn)行穩(wěn)定連續(xù)傳代培養(yǎng)P1至P5，均可維持良好的生長(zhǎng)，細(xì)胞形態(tài)均一正常。
有效維持細(xì)胞干性
Vitronectin、Laminin511和Laminin521培養(yǎng)的iPSC可以有效維持干性相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)。
產(chǎn)品推薦
| Cat.NO. | Product Name |
| C28D | Recombinant Human Laminin521 E8 Protein |
| GMP-C28D | Recombinant Human Laminin521 E8 Protein, GMP Grade |
| C28C | Recombinant Human Laminin511 E8 Protein |
| C395 | Recombinant Human Vitronectin |
| GMP-C395 | Recombinant Human Vitronectin, GMP Grade |
| CH38 | Recombinant Human NovoNectin® (Fibronectin) |
| GMP-CH38 | NovoNectin® GMP Grade (Fibronectin) |
參考文獻(xiàn)
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