?Peptide Hydrogel Suitable for 3D Cell Culture
——3D多肽水凝膠完美超越基質(zhì)膠（matrigel）
Yeasen多肽水凝膠產(chǎn)品是由一種由16個(gè)氨基酸組成的多肽，在鹽離子存在情況下自發(fā)組裝成的水凝膠支架結(jié)構(gòu)。多肽的大小通常在5nm左右，是親水性和疏水性氨基酸殘基交替排列組成的兩性分子肽段，能形成折疊片結(jié)構(gòu)，并自組裝形成納米纖維，這些納米纖維相互交織在一起形成基質(zhì)并進(jìn)一步形成含水量超過(guò)99.5%的水凝膠支架（見(jiàn)圖1）。
Yeasen多肽水凝膠無(wú)需通過(guò)調(diào)節(jié)聚合物和交聯(lián)劑的量來(lái)獲得不同類(lèi)型的水凝膠。組分單一，受環(huán)境影響小，針對(duì)不同類(lèi)型細(xì)胞配有不同類(lèi)型水凝膠產(chǎn)品，可直接進(jìn)行挑選使用。
圖1:圖示為兩性多肽通過(guò)自組裝形成水凝膠的過(guò)程。
3D多肽水凝膠的特點(diǎn)：
還原體內(nèi)外壞境，給細(xì)胞更真實(shí)的感覺(jué)——Yeasen水凝膠系列產(chǎn)品在適當(dāng)條件下，可自組裝成平均孔徑為50~200nm的纖維狀結(jié)構(gòu)，形成與天然細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）相似的網(wǎng)狀立體結(jié)構(gòu)，能夠?yàn)榧?xì)胞的粘附、遷移、增殖和分化提供更接近體內(nèi)的外環(huán)境。
組分明確，無(wú)動(dòng)物異源蛋白和病原體——Yeasen水凝膠系列產(chǎn)品是一種人工合成的多肽類(lèi)生物納米材料，由1%（w/v）的合成多肽及99%的水組成，無(wú)需通過(guò)腫瘤分離，能有效避免因動(dòng)物異源蛋白和病原體污染造成的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制等其他不利影響。
操作簡(jiǎn)單，觀察方便——可以直接用熒光染料和免疫試劑對(duì)培養(yǎng)在3D水凝膠中的細(xì)胞的進(jìn)行標(biāo)記，Yeasen水凝膠產(chǎn)品外觀呈透明狀，可用共聚焦顯微鏡或其它顯像技術(shù)獲得清晰的細(xì)胞形態(tài)圖像。Yeasen多肽水凝膠4度保存，可室溫操作。
3D細(xì)胞培養(yǎng)水凝膠功能：
（1）適合大多數(shù)種類(lèi)細(xì)胞的培養(yǎng)。
（2）促進(jìn)細(xì)胞的分化，例如，肝前體細(xì)胞、大鼠PC12細(xì)胞、心肌細(xì)胞、海馬神經(jīng)元細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞等；
（3）增強(qiáng)原代細(xì)胞貼壁能力，如神經(jīng)元細(xì)胞、成纖維細(xì)胞及角化細(xì)胞等；
（4）增強(qiáng)轉(zhuǎn)染細(xì)胞系的貼壁能力，如MG-63、SH-SY5Y、HEK-293及NIH3T3等。
3D細(xì)胞培養(yǎng)水凝膠（Hydrogel）與基質(zhì)膠（Matrigel）對(duì)比
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? |
3D細(xì)胞培養(yǎng)水凝膠（Hydrogel） |
基質(zhì)膠（Matrigel） |
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生產(chǎn)方式 |
人工合成 |
EHS小鼠腫瘤中分離 |
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主要成分 |
1%（w/v）的合成多肽+99%的水 |
主要成分由層粘連蛋白，Ⅳ型膠原，巢蛋白，硫酸肝素糖蛋白等，還包含生長(zhǎng)因子和基質(zhì)金屬蛋白酶等 |
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外觀 |
透明 |
淡黃色到深紅色（含酚紅） |
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批次差異性 |
穩(wěn)定 |
批次濃度差異性大 |
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儲(chǔ)存 |
2-8℃ |
-20℃，使用時(shí)需要過(guò)夜融化 |
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運(yùn)輸 |
冰袋 |
干冰 |
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適用實(shí)驗(yàn)類(lèi)型 |
促進(jìn)增殖和分化；促進(jìn)原代細(xì)胞貼壁和增殖；支持轉(zhuǎn)染細(xì)胞的增長(zhǎng)；干細(xì)胞增殖，腫瘤細(xì)胞遷移/侵襲 |
細(xì)胞生長(zhǎng)、分化，形態(tài)研究，細(xì)胞化學(xué)功能，細(xì)胞遷移/侵襲，細(xì)胞基因/蛋白表達(dá)，裸鼠成瘤 |
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使用濃度 |
0.1%-1% |
根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康南♂專(zhuān)?/span>1:3或原液） |
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操作注意事項(xiàng) |
室溫；避免引入鹽離子，用無(wú)菌蔗糖或去離子水稀釋 |
嚴(yán)格低溫：實(shí)驗(yàn)涉及的液體、耗材需提前預(yù)冷 |
【注】如用于血管生成實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)購(gòu)買(mǎi)高濃度基質(zhì)膠（貨號(hào)：354248）
簡(jiǎn)便的操作流程：
1）水凝膠原液水浴超聲（或渦旋振蕩）30 min，離心去除氣泡；
2）用20%無(wú)菌蔗糖稀釋超聲后的水凝膠至需要的濃度；
3）消化收集細(xì)胞，離心去除培養(yǎng)基；
4）用10%無(wú)菌蔗糖重懸細(xì)胞至需要的濃度；
5）取等體積（1:1）稀釋的水凝膠和細(xì)胞懸液迅速混勻；
6）迅速（2 min內(nèi)）將上述水凝膠和細(xì)胞混合物轉(zhuǎn)移至細(xì)胞培養(yǎng)板等；
7）緩慢加入細(xì)胞培養(yǎng)基，30 min內(nèi)更換2次培養(yǎng)基；
8）30~60 min即可成膠。
實(shí)例展示:
1）用于成人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)（Cat No. 40134ES）