類器官培養(yǎng)神器--p160ROCK小分子抑制劑Y27632
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類器官是在體外，經(jīng)過3D培養(yǎng)，將干細(xì)胞培養(yǎng)于基質(zhì)膠中，在小分子化合物、細(xì)胞因子、培養(yǎng)基添加劑等物質(zhì)作用下培養(yǎng)得到的相應(yīng)器官類似的組織結(jié)構(gòu)，能夠在體外模擬正常（或疾病）狀態(tài)下體內(nèi)器官（或組織）的三維結(jié)構(gòu)和生理功能，具有自我更新和自組織能力，適用于分子和細(xì)胞生物學(xué)分析，在動物和細(xì)胞水平之間，為腫瘤研究、藥物篩選、再生醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域提供了一個更好的解決方案，已被廣泛應(yīng)用于功能組織誘導(dǎo)、疾病模型建立、藥物篩選、抗炎試驗(yàn)、臨床端研究等多個方面的研究，在基礎(chǔ)研究和轉(zhuǎn)化應(yīng)用中具有很大的應(yīng)用前景。
隨著類器官培養(yǎng)系統(tǒng)和實(shí)驗(yàn)技術(shù)的不斷發(fā)展，類器官培養(yǎng)已用于各種組織和器官，包括腸道（小腸/結(jié)腸）、胃、肝臟、心臟、肺、前列腺、胰腺、腎臟、乳腺、腦類、視網(wǎng)膜以及內(nèi)耳等。
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Y-27632是一種Rho相關(guān)蛋白激酶p160ROCK的小分子抑制劑，對于p160ROCK的Ki值為140 nM，比對其他激酶，包括PKC、cAMP依賴性蛋白激酶，MLCK和PAK，作用強(qiáng)200倍。Y-27632通過靶向結(jié)合ROCK-1/2的催化位點(diǎn)，抑制其激酶活性。因此，Y-27632可以作用于Rho介導(dǎo)的應(yīng)力纖維的形成，抑制G1-S期細(xì)胞周期進(jìn)程和胞質(zhì)分裂。此外，Y-27632還能夠通過調(diào)節(jié)上皮-間充質(zhì)過渡樣誘導(dǎo)人多能干細(xì)胞(hIPSCs)選擇性地分化為間胚層譜系。
圖1 Y-27632化學(xué)結(jié)構(gòu)式(CAS. NO: 146986-50-7)
圖2 Y-27632 dihydrochloride化學(xué)結(jié)構(gòu)式(CAS. NO: 129830-38-2)
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Y027632是干細(xì)胞培養(yǎng)過程中不可或缺的神藥。在類器官構(gòu)建過程中，Y-27632可以阻止干細(xì)胞的凋亡，提高克隆形成效率(1% ~ 27%)，一般在種板培養(yǎng)的第一次加入，后續(xù)換液培養(yǎng)不必添加該小分子。Yoshiki Sasai篩選Y-27632的paper發(fā)表于2007年的Nature Biotechnology，至今已被引用上千次。
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