中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院病理科應(yīng)用全自動免疫組化（IHC）平臺檢測BRAF V600E基因突變，與臨床廣泛使用的檢測方法比較，包括實(shí)時熒光PCR法（Real-time PCR）及Sanger測序法，總體符合率為99%，特異性為99%，敏感性為100%，提示全自動免疫組化方法可用于檢測腫瘤組織中BRAF V600E基因突變狀態(tài)。該研究于2015年3月18日在線發(fā)表在Scientific Reports上。
BRAF基因編碼一種絲氨酸/蘇氨酸特異性激酶，是MAPK信號通路的重要轉(zhuǎn)導(dǎo)因子，參與調(diào)控細(xì)胞生長、分化和凋亡等。BRAF基因突變在腫瘤患者中首先發(fā)現(xiàn)于2002年，最常見的突變是第15號外顯子上的V600E突變。BRAF V600E突變可發(fā)生于多種腫瘤，如黑色素瘤、結(jié)直腸癌、甲狀腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌等，常見于甲狀腺乳頭狀癌、惡性黑色素瘤、結(jié)直腸癌。研究表明，BRAF V600E突變預(yù)示Ⅱ和Ⅲ期結(jié)腸癌患者預(yù)后不良。NCCN指南推薦的Lynch綜合癥的檢測策略中，推薦在DNA錯配修復(fù)蛋白缺失的病例中進(jìn)行BRAF基因突變檢測。BRAF是甲狀腺乳頭狀癌最為常見的基因突變，BRAF V600E突變可用于甲狀腺乳頭狀癌的鑒別診斷。BRAF V600E突變的存在與甲狀腺乳頭狀癌患者死亡率增加相關(guān)。甲狀腺癌NCCN指南指出，BRAF是影響預(yù)后的重要因素之一。更重要的是，BRAF激酶抑制劑威羅菲尼Vemurafenib一期和二期臨床實(shí)驗(yàn)證明攜帶BRAF V600E突變的黑色素瘤患者對抑制劑響應(yīng)率超過50%，6個月總體生存率84%。因此，BRAF基因突變檢測已成為多種腫瘤臨床診治必需的檢測項(xiàng)目。
目前，BRAF基因突變檢測平臺臨床上普遍采用的是直接測序法和Real-time PCR法，這兩種方法檢測準(zhǔn)確性較高，但操作比較復(fù)雜，檢測周期較長。因此選擇合適的BRAF基因突變檢測方法十分重要。本研究中應(yīng)用全自動免疫組化方法結(jié)合BRAF V600E突變特異性抗體檢測了779例腫瘤樣本，包括611例結(jié)直腸癌，127例甲狀腺乳頭狀癌和41例惡性黑色素瘤。在779例樣本中，150例BRAF（V600E）IHC結(jié)果陽性，其中38例（611，6%）結(jié)直腸癌，102例（127，80%）甲狀腺乳頭狀癌和10例（41，24%）惡性黑色素瘤。與Sanger測序和實(shí)時熒光PCR方法比較，BRAF V600E IHC的特異性為99%，敏感性為100%。該項(xiàng)研究的重要意義在于，將全自動IHC 檢測BRAF V600E作為一個簡單、經(jīng)濟(jì)、快速實(shí)用的篩選方法，對于推廣作為常規(guī)病理檢測項(xiàng)目的應(yīng)用提供了詳實(shí)的臨床試驗(yàn)依據(jù)，具有很強(qiáng)的臨床實(shí)際應(yīng)用價值。