支原體(PPLO)是一種小的(0.2–0.3微米)無壁細菌,可以在哺乳動物細胞培養物中生長到非常高的濃度,通常為107–108個生物體/ml,而通過常規光學顯微鏡仍無法觀察到。使用電鏡可以觀察到,(如下圖)盡管晚期支原體污染會導致細胞培養基變酸性,但除下文所述外,通常沒有明顯的跡象表明培養物受到污染。

支原體放大后:

哺乳動物細胞培養物的特征:在污染的早期階段,支原體通常不會引起培養基的pH值變化,也不會對哺乳動物細胞產生顯著的毒性影響。支原體的生長主要與哺乳動物的細胞膜有關。在許多情況下,沒有支原體污染的跡象,然而,支原體可引起細胞生長特性的變化、細胞代謝的抑制、核酸合成的破壞、染色體畸變、細胞膜抗原性的變化,并可改變轉染率和病毒可接受性。
確認支原體污染的唯一方法是使用特殊技術進行常規檢測,操作流程如下圖:

培養物中的典型感染途徑:在大多數情況下,支原體污染是通過未經測試的感染細胞與其他細胞系的交叉污染發生的。當一次有一個以上的細胞系感染時,或者當同一瓶培養基用于一個以上細胞系時,該污染通常是通過在移液過程中的空氣中的微觀霧化或在常規處理過程中的培養基開始轉移到其他細胞上。
最好的預防措施是良好的無菌技術與常規檢測相結合。在一天或一周的工作中,為了處理培養物,要盡量做到“從干凈到臟”。也就是說,首先處理已確認的未受污染的細胞,其次處理未知或未經測試的細胞,最后處理懷疑或已知受污染但因特殊原因必須留在實驗室的細胞。
抗生素:細胞培養中使用的大多數常規抗生素對支原體無效。硫酸慶大霉素、硫酸卡那霉素和酒石酸泰樂菌素在一定程度上是有效的,但可能只是抑制性的,而不是殺支原體的,
怎么辦?配制是個問題 ,濃度各個文獻所述的也不太一樣?
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