阿拉丁幫助您尋找成像Ca2+和細(xì)胞功能的最佳指標(biāo)和電離層。

鈣（Ca2+）是一種重要的無處不在的第二信使，參與調(diào)節(jié)多種細(xì)胞過程，包括細(xì)胞增殖、基因轉(zhuǎn)錄、肌肉收縮和內(nèi)吞作用。

使用本指南，我們可以為您的實驗找到最佳的Ca2+指示器，螯合劑和離子團(tuán)。

Ca2+指標(biāo)一目了然

BAPTA

BAPTA是一種非熒光Ca2+螯合劑，從EGTA中提取，對Ca2+的選擇性為Mg2+的105倍。它通常用于緩沖，在沒有Mg2+的情況下，Kd為160 nM。也可提供AM形式。

Fura-2

Fura-2是第一種商業(yè)化的熒光鈣指示劑。激發(fā)比為340 nm/380 nm，發(fā)射波長為505 nm。在科學(xué)文獻(xiàn)中有成千上萬的Fura-2參考文獻(xiàn)，它是迄今為止最重要的Ca2+指示染料之一。

Indo-1

Indo-1與Fura-2在1986年同時推出。它也是比例的，但模式不同。當(dāng)在346 nm激發(fā)時，它在475 nm/405 nm處表現(xiàn)出發(fā)射比，而不是激發(fā)比。與Fura-2不同，它有光漂白的傾向。它也被用于各種各樣的應(yīng)用，以大量的文獻(xiàn)出版物為例。

Fluo-8

自1989年引入以來，熒光成像揭示了Ca2+信號通路中許多基本過程的空間動力學(xué)。在細(xì)胞實驗中發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)luo-8(或Fluo-2介質(zhì)親和力)比Fluo-4更亮(1.5倍)。它改善了細(xì)胞負(fù)載和Ca2+響應(yīng)，同時保持方便的Fluo-3和Fluo-4光譜波長，在490 nm處最大激發(fā)，在520 nm處最大發(fā)射。Fluo-8加載可在室溫下進(jìn)行。

Rhod-2

Rhod-2于1989年首次問世，其熒光激發(fā)極值在552 nm，發(fā)射極值在581 nm。在Ca2+結(jié)合之前，Rhod-2本質(zhì)上是不熒光的，隨著Ca2+濃度的增加，Rhod-2變得更加熒光。Rhod-2較長的激發(fā)和發(fā)射使該指示物在具有高水平自身熒光的細(xì)胞和組織的實驗中非常有用，并可與其他波長較短的熒光染料進(jìn)行多路復(fù)用。這些基于羅丹明的指示物的AM酯形式是陽離子的，這可以導(dǎo)致電位驅(qū)動的攝取進(jìn)入線粒體。

Fluo-4 AM

Fluo-4是Fluo-3的類似物，兩個氯取代基被氟取代，這導(dǎo)致熒光激發(fā)增強在488 nm，因此更高的熒光信號水平。

Fluo-5 AM

Fluo-5 AM是Fluo-4的類似物，但其鈣結(jié)合親和力降低，因此適合檢測細(xì)胞內(nèi)鈣水平，這將飽和Fluo-4 AM指示劑。

鈣離子載體

A23187(鈣霉素)具有可被紫外光激發(fā)的固有熒光，使其對可被紫外光激發(fā)的Ca2+指示劑(如Fura-2)不太有用，但對長波長Ca2+指示劑(如Fluo-2)仍然有用。

4-溴A-23187是非熒光的，因此與所有Ca2+指示劑兼容。它通常用于熒光Ca2+指標(biāo)的原位校準(zhǔn)，以平衡細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外Ca2+濃度，并允許Mn2+進(jìn)入細(xì)胞，淬滅細(xì)胞內(nèi)的染料熒光。

離子霉素是一種有效的Ca2+離子胞體，通常用于校準(zhǔn)熒光Ca2+指標(biāo)和修改細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度，并用于研究Ca2+在細(xì)胞過程中的調(diào)節(jié)特性。

參考文獻(xiàn)

1.Erdahl WL, Chapman CJ, Taylor RW, Pfeiffer DR. Ca2+ transport properties of ionophores A23187, ionomycin, and 4-BrA23187 in a well defined model system. Biophys J. 1994 May;66(5):1678-93.
2. Drummond IA, Lee AS, Resendez E Jr, Steinhardt RA. Depletion of intracellular calcium stores by calcium ionophore A23187 induces the genes for glucose-regulated proteins in hamster fibroblasts. J Biol Chem. 1987 Sep 15;262(26):12801-5.