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LY2857785

MCE 國(guó)際站：LY2857785

品牌：MedChemExpress (MCE)

CAS：1619903-54-6

純度：0.9992

貨號(hào)：HY-12293

存儲(chǔ)條件：粉末 -20°C 3 年 4°C 2 年 溶劑中 -80°C 2 年 -20°C 1 年

運(yùn)輸條件：美國(guó)大陸的室溫；其他地方可能有所不同。

產(chǎn)品活性：LY2857785 是一種I型可逆的 ATP 競(jìng)爭(zhēng)性的 CDK9，CDK8 和 CDK7 抑制劑，IC50 分別為 11 nM，16 nM 和 246 nM。

體外：LY2857785 對(duì) 114 種蛋白激酶表現(xiàn)出良好的選擇性，只有 5 種其他蛋白激酶被抑制，其效力 (IC50) 小于 0.1 μM，總共 14 種激酶的效力小于 1 μM。在細(xì)胞水平上，LY2857785 抑制 U2OS 細(xì)胞中的 CTD P-Ser2 和 CTD P-Ser5，IC50 分別為 0.089 (n=13) 和 0.042 (n=1) μM。然而，LY2857785 僅誘導(dǎo)中等程度的 G2-M DNA 含量增加，從 35% 增加到 55%，EC50 為 0.135 μM。LY2857785 在 MV-4-11、RPMI8226 和 L363 細(xì)胞中表現(xiàn)出有效的化合物暴露和時(shí)間依賴性細(xì)胞增殖抑制。孵育 4 至 24 小時(shí)后，細(xì)胞生長(zhǎng)抑制效力在 8 小時(shí)時(shí)達(dá)到最大，對(duì) MV-4-11、RPMI8226 和 L363 細(xì)胞的 IC50 分別為 0.04、0.2 和 0.5 μM。LY2857785 誘導(dǎo)的癌細(xì)胞凋亡也具有時(shí)間依賴性，在 L363 細(xì)胞中 8 小時(shí)時(shí)達(dá)到最大效力，IC50 為 0.5 μM[1]。MCE 尚未獨(dú)立證實(shí)這些方法的準(zhǔn)確性。它們僅供參考。

體內(nèi)：在 HCT116 異種移植腫瘤小鼠中，LY2857785 表現(xiàn)出劑量依賴性 RNAP II CTD P-Ser2 抑制作用，TED50 為 4.4 mg/kg，TEC50 為 0.36 μM。在 HCT116 和 MV-4-11 裸鼠異種移植模型中，LY2857785 在 TED70（8 mg/kg）下還表現(xiàn)出持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)的 CTD P-Ser2 抑制作用，持續(xù)時(shí)間為 3 至 6 小時(shí)。在裸鼠 MV-4-11 異種移植模型中，LY2857785 同樣表現(xiàn)出劑量依賴性 CTD P-Ser2 抑制作用，TED70（7 mg/kg）和 TED90（10 mg/kg）下持續(xù) 8 小時(shí)。 LY2857785 在 AML MV-4-11 異種移植腫瘤模型中表現(xiàn)出最顯著的腫瘤消退，無(wú)論是小鼠靜脈推注還是大鼠靜脈輸注[1]。MCE 尚未獨(dú)立證實(shí)這些方法的準(zhǔn)確性。它們僅供參考。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：小鼠和大鼠[1] 對(duì)于異種移植模型，將人類癌細(xì)胞 U87MG、MV-4-11、A375 和 HCT116 植入雌性裸鼠或無(wú)胸腺裸鼠體內(nèi)。動(dòng)物分別接受生理鹽水、雷帕霉素或 LY2857785 治療。裸鼠體內(nèi)的 MV-4-11 異種移植瘤通過(guò)靜脈推注 LY2857785（4、8 和 18 mg/kg）治療。裸鼠體內(nèi)的 MV-4-11 異種移植瘤通過(guò)靜脈輸注 LY2857785（3、6 和 9 mg/kg）治療，持續(xù) 4 小時(shí)。未經(jīng)治療的對(duì)照組每 3 天靜脈注射一次生理鹽水。使用 Beckman Coulter 的 CXP 軟件進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析。 LY2857785 和/或?qū)φ栈衔锏男Ч慕y(tǒng)計(jì)學(xué)意義通過(guò) Dunnett 方法、單因素方差分析進(jìn)行評(píng)估。MCE 尚未獨(dú)立證實(shí)這些方法的準(zhǔn)確性。它們僅供參考。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：將實(shí)體瘤細(xì)胞接種在聚-D-賴氨酸包被的96孔板中，將血液細(xì)胞系接種在未包被的96孔板中過(guò)夜，然后用化合物（例如LY2857785）處理。將實(shí)體瘤細(xì)胞在室溫下用Prefer固定20分鐘，然后用PBS中的0.1％Triton X-100滲透15分鐘。用抗活化的caspase-3通過(guò)免疫熒光測(cè)量caspase-3的表達(dá)。用原位細(xì)胞死亡檢測(cè)試劑盒測(cè)量末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記（TUNEL）活性。兩種測(cè)定均在Acumen Explorer激光掃描熒光微孔板流式細(xì)胞儀上進(jìn)行分析。用CellTiter-Glo發(fā)光細(xì)胞活力測(cè)定法[1]測(cè)定血液腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞活力。MCE尚未獨(dú)立證實(shí)這些方法的準(zhǔn)確性。它們僅供參考。

激酶實(shí)驗(yàn)：CDK7 和 CDK9 反應(yīng)混合物分別含有 10 mM Tris-HCl (pH 7.4)、10 mM HEPES、5 mM DTT、10 μM ATP、0.5 μCi 33p-ATP、10 mM MnCl2、150 mM NaCl、0.01% Triton X-100、2% DMSO、0.05 mM CDK7/9ptide 和 2 nM CDK7/Mat1/cyclin H 或 2 nM CDK9/cyclin T1。CDK8/cyclin C 反應(yīng)在 HEPES 30 mM、DTT 2 mM、MgCl2 5 mM、0.015% Triton X-100、5 μM ATP 和 400 nM RBER-CHKStide（含 20 nM 酶）中進(jìn)行。將 LY2857785 在 DMSO 中按 1:3 的比例連續(xù)稀釋，以測(cè)定劑量反應(yīng)。反應(yīng)在 96 孔聚苯乙烯板中進(jìn)行。反應(yīng)在室溫下孵育 60 分鐘，然后用 10% H3PO4 或 10% 三氯乙酸 (TCA) 終止。對(duì)于濾膜結(jié)合測(cè)定，將反應(yīng)轉(zhuǎn)移到 96 孔濾膜中，并通過(guò) Microbeta 閃爍計(jì)數(shù)器測(cè)量。對(duì)于 ADP Transcreener 熒光偏振測(cè)定，反應(yīng)用 ADP 檢測(cè)混合物猝滅，在室溫下孵育 2 小時(shí)，然后在 Tecan Ultra 384 平板讀數(shù)器上以 λex=610 nm、λem=670 nm 測(cè)量 FP。使用制備的 ADP/ATP 稀釋系列作為標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)毫極化 (μP) 計(jì)算 ADP 產(chǎn)物的濃度。激酶分析在 96 孔聚苯乙烯板中進(jìn)行。簡(jiǎn)而言之，在最終體積為 25 μL 的溶液中，將酶與適當(dāng)?shù)木彌_液、肽底物和稀釋的 LY2857785 一起孵育。通過(guò)添加 ATP/[33P] 來(lái)啟動(dòng)反應(yīng)，并將 ATP 混合物在室溫下孵育 40 分鐘。通過(guò)添加 5 μL 3% 磷酸來(lái)淬滅反應(yīng)，將 10 μL 反應(yīng)物滴到濾墊上，在 75 mM 磷酸中清洗 3 次，每次 5 分鐘，在甲醇中清洗 1 次。濾膜干燥后，進(jìn)行閃爍計(jì)數(shù)[1]。MCE 尚未獨(dú)立證實(shí)這些方法的準(zhǔn)確性。它們僅供參考。

IC50 & Target：CDK9 0.011 μM (IC50) CDK8 0.016 μM (IC50) CDK7 0.246 μM (IC50)

熱銷產(chǎn)品：Saccharin  | Verminoside  | DX600  | Diallyl Trisulfide  | RNAIII-inhibiting peptide(TFA)  | Citalopram  | FH1  | Brassicasterol  | Ethionamide  | Xanthosine

Trending products：Recombinant Proteins  |  Bioactive Screening Libraries  |  Natural Products  |  Fluorescent Dye  |  PROTAC  |  Isotope-Labeled Compounds  |  Oligonucleotides

參考文獻(xiàn)：

[1]. Yin T, et al. A novel CDK9 inhibitor shows potent antitumor efficacy in preclinical hematologic tumor models. Mol Cancer Ther. 2014 Jun;13(6):1442-56. Mol Cancer Ther. 2014 Jun;13(6):1442-56.