2025年12月23日，沙礫生物新一代基因敲除型腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞（Tumor-Infiltrating Lymphocytes,TIL）產(chǎn)品GT307注射液獲FDA IND批準(zhǔn)。GT307是一款基于CRISPR基因編輯技術(shù)的下一代雙基因敲除型TIL產(chǎn)品，旨在解決傳統(tǒng)TIL在腫瘤微環(huán)境中易發(fā)生功能耗竭、持續(xù)性不足等關(guān)鍵瓶頸問題。該項(xiàng)目選擇了高保真CRISPR/AaCas12bMax編輯器，標(biāo)志著這一類具備“0脫靶”特性的基因編輯工具，正在從研究端走向臨床端。
高保真正在成為基于基因編輯的細(xì)胞療法“隱形門檻”
在基因與細(xì)胞治療領(lǐng)域，監(jiān)管對脫靶風(fēng)險(xiǎn)、編輯一致性及原材料的合規(guī)性一貫高度關(guān)注，這也是近年IND批準(zhǔn)審核中的關(guān)鍵技術(shù)考量。這意味著編輯工具本身是否具備“臨床可用能力”，正在直接影響項(xiàng)目推進(jìn)。在這一背景下，近岸蛋白完成臨床級“0脫靶”基因編輯器AaCas12bMax的FDA DMF備案（DMF No.041711），成為行業(yè)中少數(shù)可被IND/NDA直接關(guān)聯(lián)引用的編輯工具之一。DMF文件系統(tǒng)性覆蓋產(chǎn)品特性、分析方法、生產(chǎn)工藝及關(guān)鍵質(zhì)量控制點(diǎn)，可通過授權(quán)信機(jī)制，支持中美雙報(bào)客戶加速注冊申報(bào)。
為什么是AaCas12bMax，而不是“更熟悉的Cas9”？
1 天然“0脫靶”的高保真特性
Cas12b（C2C1）源自酸性脂環(huán)酸芽孢桿菌（Alicyclobacillus acidiphilus），其對sgRNA spacer的堿基錯配容忍度極低，在人和小鼠細(xì)胞中幾乎不容忍任何單個(gè)mismatch。這一特征使得Cas12b系統(tǒng)具有極高的編輯位點(diǎn)保真性，潛在脫靶編輯位點(diǎn)和脫靶編輯概率均遠(yuǎn)低于Cas9和Cas12a，顯著提高基因編輯安全性，對標(biāo)安全性要求極高的臨床應(yīng)用場景。
Cas12b天然具有“0脫靶”效應(yīng)[1]
基于unbiased分析的潛在脫靶位點(diǎn)，AaCas12bMax系統(tǒng)具有遠(yuǎn)低于Cas9的潛在脫靶位點(diǎn)和染色體易位風(fēng)險(xiǎn)
2 工程化升級：AaCas12bMax=高效率+高保真
通過MIDAS蛋白工程化體系改造，AaCas12bMax在保留天然“0脫靶”特性的同時(shí)，編輯效率已提升至可媲美Cas9的水平。這也是其已被應(yīng)用于近30個(gè)KO靶點(diǎn)臨床轉(zhuǎn)化研發(fā)管線的關(guān)鍵原因。
AaCas12bMax系統(tǒng)在各類體外細(xì)胞系以及原代細(xì)胞中（T細(xì)胞、干細(xì)胞等），均表現(xiàn)出優(yōu)秀的編輯效率（＞90%）。
值得注意的是，在沙礫生物AaCas12bMax編輯后的TIL產(chǎn)品中，細(xì)胞擴(kuò)增能力和細(xì)胞存活能力得到顯著的提高，TIL擴(kuò)增后產(chǎn)生的總細(xì)胞數(shù)增加了3-5倍。更進(jìn)一步地，這些AaCas12bMax編輯后的TIL產(chǎn)品表現(xiàn)出更高的細(xì)胞干性、更低的耗竭特征和凋亡率、以及在體內(nèi)回輸后更強(qiáng)的擴(kuò)增能力。這表明，相對于傳統(tǒng)SpCas9系統(tǒng)基因編輯會對TIL產(chǎn)品造成應(yīng)激損傷，AaCas12bMax編輯損傷更小、編輯后的TIL產(chǎn)品能夠具有更好的細(xì)胞狀態(tài)。RNA-seq組學(xué)研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，AaCas12bMax編輯后T細(xì)胞產(chǎn)品的DNA修復(fù)速度更快，同時(shí)細(xì)胞凋亡低于SpCas9[2]。
AaCas12bMax在體外編輯應(yīng)用中具有與Cas9幾乎相同水平的敲除效率和遠(yuǎn)低于Cas9的脫靶效應(yīng)。
3 規(guī)避Cas9專利壁壘，釋放商業(yè)化空間
與Cas9復(fù)雜且昂貴的國際專利網(wǎng)絡(luò)不同，AaCas12bMax擁有清晰、可控的底層與應(yīng)用層專利體系：
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底層專利已在中、美、日等多國授權(quán)
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天澤云泰擁有基因與細(xì)胞治療領(lǐng)域授權(quán)，近岸蛋白獲得AaCas12bMaxGMP級和RUO級蛋白的生產(chǎn)和市場推廣銷售許可。
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避免多重專利許可疊加帶來的不確定性和高成本
這使基于AaCas12bMax的基因與細(xì)胞療法在全球化布局與長期商業(yè)化上具備明顯優(yōu)勢。
4 不只是一個(gè)酶，而是一套“臨床可用”的基因編輯解決方案
隨著基因與細(xì)胞治療的不斷發(fā)展，編輯工具的選擇，已不再只是效率之爭，而是安全性、合規(guī)性與長期可持續(xù)性的綜合判斷。AaCas12bMax正在成為下一個(gè)臨床級基因編輯器之一。
參考文獻(xiàn)
[1]Teng, F., et al., Repurposing CRISPR-Cas12b for mammalian genome engineering. Cell discovery, 2018. 4(1): p. 63.
[2]沙礫生物官方公眾號