2024年4月4日CA: A Cancer Journal for Clinicians期刊發布了最新的2022年全球癌癥數據統計。根據世界衛生組織國際癌癥研究機構（IARC）的最新評估數據，2022年全球癌癥新增病例1996萬例，全球癌癥死亡病例974萬例。2022年癌癥死亡病例數前十的癌癥分別是肺癌（182萬，18.7%）、結直腸癌（90萬，9.3%）、肝癌（76萬，7.8%）、女性乳腺癌（67萬，6.9%） 、胃癌（66萬，6.8%）、胰腺癌（47萬，4.8%）、食道癌（44.5萬，4.6%）、前列腺癌（40萬，4.1%）、宮頸癌（35萬，3.6%）、白血病（30.5萬，3.1%）。
圖.2022年全球癌癥的病例和死亡分布類型
其中胰腺癌是一種惡性度高、治療效果差的腫瘤，胰腺癌的五年生存率約為10%，被醫學界稱為“癌中之王”。但是并非完全不能治療，對于早期發現的胰腺癌，可以通過根治性手術結合術后化療、放療等綜合治療。因此針對不同病人找到合適的治療藥物是關鍵所在。
胰腺癌類器官（organoids）是指利用胰腺瘤細胞等在體外培養出的3D細胞培養物并具有一定的空間結構組織類似物。胰腺癌類器官可以作為疾病模型，相較于傳統2D疾病模型，其在闡明疾病的發展、穩態性和發病機理等與體內環境更加接近，能作為胰腺癌治療、診段和發病機制研究的理想試驗模型。
胰腺癌類器官構建實驗步驟
01 取材：標本離體后，盡快取材。采用無菌器械，保證無菌環境，將腫瘤組織放入含有5 mL的原代組織保存液的 15 mL 離心管中，4℃轉運;02
清洗：在生物安全柜中取出樣品管，去除組織保存液，加入適量冷的添加有雙抗的 PBS，反復清洗后，去除 PBS；
03 重復清洗：重復第 2 步驟 3 次；04 組織處理：去除 PBS緩沖液后，將組織塊移至10 cm含10 mL冷原代 組織保存液的無菌培養皿中，用無菌眼科顯微剪將組織剪碎（直徑約 0.5mm~1mm）；05
重復清洗：使用常溫PBS，重復第2步驟3次；
06
收集組織碎片，加入組織消化液消化，因胰腺癌組織較硬，消化需要時間30 min，重復2-3次，過70 μm篩網，收集胰腺癌細胞；
07
紅細胞裂解：加入10 mL紅細胞裂解緩沖液，室溫下在翹板搖床上搖10 min；
08
重復清洗：裂解完畢，使用常溫 DMEM/F12，重復第 2步驟3次；
09
類器官種板：調整細胞密度為2~3×106，與Ceturegel基質膠1:1均勻混合，將細胞混懸液以40-60 uL每孔種在24孔板中，37℃放置15~30 min，加入預熱的類器官培養液，每個孔 750 uL；
10
類器官培養：將培養板放在 37℃ CO2培養箱培養，每2天更換培養液。加入培養液時，吸頭朝向側壁，緩慢加入；
11
重復清洗：使用常溫PBS，重復第2步驟3次；類器官觀察：每天觀察類器官并拍照，了解初始類器官數量、增殖速 度、形態、微生物污染情況等。
實驗結果
圖.胰腺癌組織（上圖）和癌旁（下圖）類器官不同周期培養結果（P為培養代次，d為培養時間）
FAQ
Q
基質膠的操作要注意哪些事項？
所有操作需在無菌環境下進行，應使用預冷的移液器以保證基質膠呈勻漿狀。
Q
獲取臨床樣本，如何避免污染？
①取材時盡量保證無菌取材；
②提取前可以用含雙抗的PBS浸泡幾分鐘：常見與外界環境有接觸可能的胃、腸、膀胱等位置腫瘤建議用含3%~5%雙抗的PBS浸泡5-10 min，其他常見腫瘤用含1%~2%雙抗的PBS浸泡5min左右；
③提取細胞過程中所用試劑均加1%雙抗及合適濃度的原代抗生素。
Q
腫瘤組織采集、保存、運輸注意事項
盡可能多采集腫瘤細胞含量高的腫瘤組織，并縮短組織樣本在空氣中暴露的時間，以減少污染概率；采集的腫瘤組織樣本盡快置于裝有專用樣本保存液的無菌管中，低溫（4 ℃左右）下快速運轉至檢測單位（盡量保證采樣后2~4 h內送到）。
Q
病灶和癌旁培養出的類器官有區別嗎？腫瘤組織的取材部位有什么要求？
有差別，腫瘤本身具有異質性，不同來源的類器官之間存在差異是很常見的現象，從形態上看，原發病灶來源的類器官比癌旁來源的類器官更具有侵襲性的結構，一般病灶形態上更加不規則一些。如果希望在建模或藥物篩選方面盡量減小誤差，可以在活性好的地方多位置取樣。
產品選擇
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產品名稱 |
產品編號 |
規格 |
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Cebrary®Tissue Digestion Solution 組織消化液 |
41423ES10/30 |
10/30 mL |
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Cebrary®Cell recovery solution for Organoid類器官回收液 |
41421ES30/60 |
30/100 mL |
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Cebrary®Cell freezing medium for Organoid 類器官凍存液 |
41422ES30/60 |
30/100 mL |
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Cebrary® Pancreatic Cancer Organoid Growth Medium（Human）胰腺癌類器官生長培養基 |
41434ES60/76 |
100/500 mL |
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Ceturegel® Matrix for Organoid culture，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質膠 |
40191ES08/10 |
5/10 mL |
相關產品
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產品類型 |
產品名稱 |
產品編號 |
規格 |
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基本濃度 |
Ceturegel® Matrix LDEV-Free基質膠 |
40183ES08/10 |
5/10 mL |
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Ceturegel® Matrix Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質膠 |
40184ES08/10 |
5/10 mL |
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低生長因子 |
Ceturegel® Matrix GFR，LDEV-Free 基質膠 |
40185ES08/10 |
5/10 mL |
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Ceturegel® Matrix GFR， Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質膠 |
40186ES08/10 |
5/10 mL |
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高濃度 |
Ceturegel® Matrix High Concentration，LDEV-Free 基質膠 |
40187ES08/10 |
5/10 mL |
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Ceturegel® Matrix High Concentration，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質膠 |
40188ES08/10 |
5/10 mL |
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Ceturegel® Matrix High Concentration，GFR，LDEV-Free 基質膠 |
40189ES08/10 |
5/10 mL |
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干細胞專用 |
Ceturegel® Matrix hESC-Qualified，LDEV-Free 基質膠 |
40190ES08/10 |
5/10 mL |
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鼠尾膠原 |
Collagen, Type I , from rat tail 鼠尾膠原蛋白I (大鼠尾) |
40125ES10/50 |
2/10 mL |
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Cebrary® Collagen, Type I , from mouse tail鼠尾膠原蛋白I型 (小鼠尾) |
40136ES10/50 |
2/10 mL |