SILAC標(biāo)記——給你的蛋白裝上GPRS
隨著人類基因組和其它物種基因組序列測(cè)定計(jì)劃的順利完成,生物學(xué)的研究從基因組時(shí)代步入后基因組時(shí)代。作為后基因組時(shí)代的重要研究領(lǐng)域之一,以蛋白質(zhì)間相互作用研究為中心發(fā)展起來(lái)的蛋白質(zhì)組學(xué),已經(jīng)成為當(dāng)今生命科學(xué)研究的熱點(diǎn)和前沿領(lǐng)域。
作為蛋白質(zhì)組學(xué)的重要技術(shù),SILAC標(biāo)記技術(shù)是體內(nèi)標(biāo)記技術(shù),幾乎不影響細(xì)胞的功能,因此其在蛋白質(zhì)組學(xué)相關(guān)領(lǐng)域中得到了廣泛的應(yīng)用,如:比較蛋白質(zhì)組學(xué)、蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用、蛋白質(zhì)與DNA相互作用、蛋白質(zhì)與RNA相互作用等領(lǐng)域。
Sigma-Aldrich公司提供SILAC標(biāo)記及后續(xù)定量蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)所需的完整產(chǎn)品線。SILAC通過(guò)不完全培養(yǎng)基可以達(dá)到最大化標(biāo)記和替代,標(biāo)記氨基酸豐度可達(dá)到99%,可以提高整體的量化精度。
主要優(yōu)勢(shì):
> 特異性強(qiáng),假陽(yáng)性率低
> 高通量,可同時(shí)鑒定并定量數(shù)百至數(shù)千種蛋白質(zhì)
> 定量精確,降低由于樣品制備不同而造成的實(shí)驗(yàn)差異
> 線性定量范圍廣
> 靈敏度更高,蛋白質(zhì)需要量明顯減少
> 標(biāo)記采用的是體內(nèi)標(biāo)記技術(shù),更接近樣品真實(shí)狀態(tài)
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SILAC實(shí)驗(yàn)流程:

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