Duolink? PLA?技術—新型蛋白研究工具，前沿科研領域之星
您是否正在研究低豐度蛋白但找不到合適的檢測方法？
您是否正在研究蛋白相互作用但得不到令人信服的結果？
您是否擔心蛋白過表達或融合標簽后會改變其原有的功能？
現在，您再也不用擔心了，因為有了Duolink? PLA?技術，所有這些問題都將迎刃而解。
Duolink?實驗基于鄰位連接技術（Proximity Ligation Assay, PLA），當一對PLA probes足夠接近時（<40 nm）會產生PLA信號，PLA信號的位置直接反映了蛋白表達量或蛋白復合體的亞細胞定位。
?
Duolink? PLA?技術特點：
> 更真實：內源表達水平檢測，不改造、修飾細胞
> 靈敏度高：信號擴增使其具有單分子級靈敏度
> 更精確：兩種一抗同時識別，極大提高特異性
> 原位顯示：同時完成目的蛋白的定位、定量檢測
> 高通量：使用多孔板和配套軟件實現高通量篩選
> 簡單快捷：無需裂解細胞、純化蛋白或WB檢測
Duolink? 應用舉例
1、 檢測穩定、瞬時和微弱的蛋白互作
Fig. 1 加入雌二醇培養48 hr的大鼠胚胎海馬神經元，原位顯示ER α與DYX1C1在神經突觸中的互作。
紅色：ER alpha/DYX1C1復合物；綠色：actin蛋白；藍色：細胞核
2、檢測蛋白的翻譯后修飾
Fig. 2? EGF刺激前后，用免疫熒光染色和PLA方法檢測U343細胞中EGFR磷酸化水平的變化。PLA方法可以檢測到EGFR的激活，而IF方法則不能。
紅色：磷酸化的EGFR蛋白；藍色：細胞核
3、高靈敏性的檢測低豐度蛋白的表達
Fig. 3 分別用免疫熒光（左下圖）和PLA方法（上圖）檢測A431細胞中EGFR的表達。與IF方法相比，PLA方法的信噪比高出100倍。
紅色：EGFR蛋白；藍色：細胞核
?
更多詳情，請訪問sigma.com/duolink
?