腦膠質(zhì)瘤約占中樞神經(jīng)腫瘤的一半， 臨床治療效果差。尤其是膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，其惡性程度極高，預(yù)后性差，是威脅人類(lèi)健康的主要惡性腫瘤之一，因此,，選擇一種有效的動(dòng)物模型是研究腦膠質(zhì)瘤發(fā)病機(jī)制及其治療方法的關(guān)鍵。豬是用于做膠質(zhì)瘤模型數(shù)量最多、用途最廣的大動(dòng)物。豬腦具有腦回，能反映人腦皮質(zhì)、皮質(zhì)結(jié)構(gòu)內(nèi)的腫瘤浸潤(rùn)、藥物遞送和藥物擴(kuò)散。以下將介紹小型豬用作腦膠質(zhì)瘤實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型受體動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)方法。
實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)豬提前24個(gè)小時(shí)禁食，自由采水。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天對(duì)小型豬進(jìn)行誘導(dǎo)麻醉，建立耳靜脈通道，對(duì)顱骨頂部進(jìn)行備皮，消毒，行氣管插管，連接好呼吸麻醉機(jī)，使用異氟烷進(jìn)行維持麻醉，術(shù)中進(jìn)行心電監(jiān)護(hù)和巡回協(xié)助。
等待實(shí)驗(yàn)豬進(jìn)入深度麻醉狀態(tài)后，即可開(kāi)始手術(shù)。從顱頂中線平行矢狀縫做5cm長(zhǎng)切口，剝離皮下筋膜和結(jié)締組織，暴露顱骨骨面，用3mm電動(dòng)鉆頭在顱骨表面做一個(gè)小孔，深度到達(dá)腦組織硬膜外即可，將腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞注射進(jìn)腦區(qū)，縫合顱骨表面結(jié)締組織和皮膚。等待動(dòng)物蘇醒，做好術(shù)后護(hù)理。
3周后對(duì)實(shí)驗(yàn)豬腦部進(jìn)行增強(qiáng)MRI檢查，驗(yàn)證腫瘤是否成形，初步評(píng)估腫瘤大小。
模型評(píng)價(jià)
1、動(dòng)物行為學(xué)評(píng)價(jià)
觀察術(shù)后實(shí)驗(yàn)豬神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)情況：如進(jìn)食情況、體重、精神狀態(tài)以及壓迫癥狀( 顱內(nèi)壓增高表現(xiàn)、偏癱) 等。
2、影像學(xué)檢查
磁共振成像( MＲI) 技術(shù)，無(wú)創(chuàng)性的影像學(xué)檢測(cè)方法，可在不處死動(dòng)物的情況下對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)情況進(jìn)行動(dòng)態(tài)的、多方位的掃查，便于在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間進(jìn)行藥效學(xué)研究。
3、病理染色
HE染色后鏡下觀察，可見(jiàn)腫瘤區(qū)較正常腦組織染色深，有較明確的邊界。腫瘤細(xì)胞豐富、密集，常排列呈束狀及小團(tuán)塊狀，細(xì)胞分化差，胞核大、圓、深染，核分裂象多見(jiàn)。腫塊內(nèi)部血管豐富，常見(jiàn)柵欄狀壞死區(qū)，瘤周組織可有水腫。Ki-67染色結(jié)果可反映腫瘤細(xì)胞的增殖能力。