秋高氣爽,正是外出旅游的大好時光,然而,有不少人在外出時出現(xiàn)打噴嚏等類似感冒的癥狀。人們通常認為春季才是花粉過敏的多發(fā)季節(jié),其實夏秋季8月至10月期間也是花粉過敏癥的高發(fā)期。秋季是植物成熟的季節(jié),也是許多草本植物花粉的傳粉時節(jié)。干燥的空氣,較大的風速,以及大量的植物花粉,使得包括過敏性鼻炎在內的一些過敏病癥的產(chǎn)生,具備了條件。
那么,關于花粉過敏我們做了哪些研究呢?此文章首次遞交因為熒光樣本中不同通道數(shù)據(jù)定量困難的技術問題被拒稿,后結合TissueGnostics公司定量分析軟件被順利接收。
特應性供體的狀態(tài)不影響樹突狀細胞對主要草花粉過敏原Phl p 5的攝取
樹突細胞(DC)是免疫系統(tǒng)的前哨,在抗原的識別與攝取,以及呈遞給原始T細胞以引發(fā)刺激與誘導中起重要作用。DC對過敏原的內化和內吞降解是誘發(fā)T細胞所需的重要步驟。
在該文章中,主要研究了純化的重組非糖基化花粉過敏原、phl p5和來自向日葵的天然非特異性脂質轉移蛋白、SF-nsLTP與人單核細胞衍生的樹突細胞(MoDC)的結合和內化。
利用免疫熒光染色檢測具有低親和力(CD23)或高親和力受體(FcεRI)的Phl p5的共定位情況,以及通過通過早期內體抗原(EEA1)和溶酶體相關膜蛋白1(LAMP1)的共染**況,對早期(EE)和晚期內體(LE)中過敏原進行了定位研究。通過實驗證明Phl p5以及SF-nsLTP可以與來自草花粉過敏和非過敏個體的MoDC結合,而且是非優(yōu)先的同時攝取。
在病理學實驗部分,應用奧地利TissueGnsotics公司的TissueFAXS掃描產(chǎn)品及TissueQuest分析軟件。
Fig1. FcDRI和CD23在MoDC中表達并結合IgE。
將源自過敏和非過敏供體的單核細胞的MoDC與Phl p 5在4 ℃ 溫育,使用針對IgE、CD23和FcεRIα的抗體固定,透化和免疫染色Cy3-Phl p5刺激的MoDC。使用TissueFAXS顯微鏡系統(tǒng)定量表面結合的IgE和IgE受體。結果來自過敏和非過敏組的兩個獨立實驗的數(shù)據(jù)。在散點圖的右角指示的IgE,F(xiàn)cεRI和CD23陽性細胞的百分比。
在本研究中,使用無血清培養(yǎng)基生成MoDC,并且在第7天檢測來自未成熟MoDC的上清液中的特異性IgE,但是由于染色通道的限制, 無法同時給出量化三種組分(Phl p 5,IgE和CD23或FcεRI)的PCC值。然而,在隨后的實驗中,使用TissueQuest軟件對這三種成分進行的代表性定量分析。Bet v 1攝取在IgE陽性和IgE陰性細胞中同樣有效,與其他研究者發(fā)表的文章結論相一致(Smole et al., 2015)。
研究者通過免疫熒光顯微鏡,觀察了來自植物花粉過敏和非過敏個體的MoDC同時攝取吸入過敏原和食物過敏原的情況。發(fā)現(xiàn)了MoDCs對Phl p 5和SF-nsLTP的攝取機制,并且表明其在植物花粉過敏和非過敏個體之間沒有顯著差異。通過建立體外細胞實驗模型,在分子水平上研究過敏原攝取的方法,可以有助于鑒定抗原加工和呈遞給T細胞的相關途徑。
利用TissueGnostics公司的軟件分析功能,可以從熒光數(shù)據(jù)分析的角度入手,解決了熒光樣本中不同通道數(shù)據(jù)定量困難的技術問題,通過數(shù)據(jù)結果與其他研究者的結論相印證,體現(xiàn)了科學研究的嚴謹性。

