在SARS-COV-2危機期間,世界各地的醫學研究人員都正在開發 SARS-COV-2 檢測方法,以跟蹤人群中的病毒暴露和可能的免疫力 (1,2,3)。檢測策略包括采用 PCR 診斷陽性感染(通過檢測存在病毒遺傳物質的情況)和使用血液檢測試劑盒(也稱為血清學檢測)。使用這些診斷工具,科學界可以更好地了解 SARS-COV-2 流行病的規模和軌跡。
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但是,來自牛津的醫學教授 John Bell 表示,包括英國和西班牙在內的國際研究界的科學家認為,許多用于評估的血清學抗體檢測試劑盒“性能不佳”。貝爾進一步指出,假陰性和/或假陽性太多,導致反映病毒暴露和可能的免疫力的流行病學數據不準確(1)。美國國家科學院新發傳染病常設委員會(the National Academy of Sciences’ Standing Committee on Emerging Infectious Diseases)和 21 世紀健康威脅(21st Century Health threats )成員對特定抗體血清學檢測的可靠性和可獲得性上表示關注 (4)。在寫給白宮的信中,美國國家科學院科學家指出,“在進行嚴格的質控及描述其性能特征后之前",對當前的抗體檢測結果”應懷有可疑的態度” (4)。
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科學界正緊鑼密鼓地開發SARS-COV-2的診斷和治療方法,所以對于抗體供應商而言,對檢測試劑進行充分的特征描述和嚴格的驗證以能夠提供高度一致性、可重復的結果比以往任何時候都更為重要。Cell Signaling Technology (CST) 提供關鍵試劑(包括專門用于 SARS-CoV-2 組合的試劑)、試劑盒和服務,以支持全世界的傳染病研究人員了解病毒的行為、如何阻斷病毒以及如何治愈它。CST 的研究人員積極參與科學合作,了解 SARS-CoV-2 的作用機制,提供深刻的見解,了解將在未來疫苗開發中使用的病毒的分子結構。
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SARS-CoV-2 研究緊迫、至關重要,我們沒有時間浪費在產生模棱兩可結果的試劑上,更沒有時間浪費在由于特異性差而失敗的實驗上。為確保質量、特異性和一致性,CST 遵循抗體驗證標志?(改編自 Uhlen, M., Bandrowski, A., Carr, S. et al. A proposal for validation of antibodies. Nat Methods 13, 823–827 (2016))。
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每種 CST 開發的抗體均經歷苛刻的相關應用的內部驗證檢測,這些檢測會根據靶標和各個抗體的進行匹配。CST 向來是生產(我們內部生產超過 95% 的商品化產品)并在內部嚴格驗證我們的產品。因為沒有任何一個單獨的測定方法可以確定驗證的有效性,所以抗體驗證檢測可以是以下各項的組合:
1) 二元模型:分析一組陽性和陰性表達的細胞系,野生型與遺傳或基于 CRISPR 的敲除
2) 范圍表達:分析大量具有已知靶標表達水平(高表達與低表達因子)、siRNA 和雜合敲除的細胞系
3) 正交數據:通過基于非抗體的分析(包括質譜法)進行驗證
4) 多種抗體:使用基于富集的應用(IP、ChIP、ChIP-seq)來觀察不同的抗體結合相同靶標的信號強弱并進行比較,或使用免疫染色應用以來證明相同的染色分布或靶標定位
5) 異源表達:天然(或突變)靶蛋白異源表達后,在細胞系中評估
6) 補充測定:使用競爭性 ELISA、肽點印跡、蛋白質陣列來確認信號特異性或用抗原肽封閉以消除修飾特異性
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另外,CST 提供了大量的針對此次病毒研究的重組單克隆抗體小包裝套裝(見下表)。這些產品可以保證批次高度一致性,且持續供應科學家。
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病毒入侵,復制和轉錄
· Endosomal Marker Antibody Sampler Kit:
Caveolin-1,Clathrin Heavy Chain,EEA1,Rab5A,Rab7,Rab11
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· ER and Golgi-Associated Marker Proteins Antibody Sampler Kit:
Calnexin,ERp72,PDI,RCAS1,Syntaxin 6
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· Organelle Localization IF Antibody Sampler Kit:
AIF,EEA1,LAMP1,PDI,RCAS1
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· Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit:
eIF4A,eIF4A1,Phospho-eIF4B,eIF4B,Phospho-eIF4E,eIF4E,Phospho-eIF4G,eIF4G,eIF4H
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· Vesicle Trafficking Antibody Sampler Kit:
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Phospho-Caveolin-1,Caveolin-1,Clathrin Heavy Chain,APPL1,EEA1,Syntaxin 6,Rab5A,GOPC
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病毒檢測和天然免疫激活
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?Rig-I Pathway Antibody Sampler Kit:
MDA-5,Rig-I,MAVS,IRF-3,TBK1/NAK,Phospho-TBK1/NAK,Phospho-IRF-3,Phospho-IKKε,IKKε
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?Toll-like Receptor Antibody Sampler Kit:
Toll-like Receptor 1,Toll-like Receptor 2,Toll-like Receptor 7,Toll-like Receptor 9
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?Toll-like Receptor Antibody Sampler Kit II:
Toll-like Receptor 1,Toll-like Receptor 2,Toll-like Receptor 3,Toll-like Receptor 6,Toll-like Receptor 7,Toll-like Receptor 8,Toll-like Receptor 9
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I 型干擾素和病毒限制因子
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Jak1,Jak2
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?Phospho-Jak Family Antibody Sampler Kit:
Jak1,Phospho-Jak1,Jak2,Phospho-Jak2,Jak3 ,Phospho-Jak3,Tyk2,Phospho-Tyk2
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?Stat Antibody Sampler Kit II:
Stat1,Stat2,Stat3,Stat4,Stat5,Stat6
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? Phospho-Stat Antibody Sampler Kit:
Phospho-Stat1,Phospho-Stat2,Phospho-Stat3,Phospho-Stat3,Phospho-Stat5,Phospho-Stat6
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細胞因子與炎癥
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· Jak/Stat Pathway Inhibitors Antibody Sampler Kit:
SOCS1, SOCS2, SOCS3, PIAS1, PIAS3, PIAS4
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Jak1,Jak2
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· Phospho-Jak Family Antibody Sampler Kit
Jak1,Phospho-Jak1,Jak2,Phospho-Jak2,Jak3 ,Phospho-Jak3,Tyk2,Phospho-Tyk2
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Stat1,Stat3,Stat5,Stat6
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· STAT Antibody Sampler Kit II:
Stat1,Stat2,Stat3,Stat4,Stat5,Stat6
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· Phospho-Stat Antibody Sampler Kit:
Phospho-Stat1,Phospho-Stat2,Phospho-Stat3,Phospho-Stat3,Phospho-Stat5,Phospho-Stat6
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細胞死亡與生存力
? Annexin V Early Apoptosis Detection Kits
? Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit (II)
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