小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)elisa試劑盒操作步驟-分析方法-資訊-生物在線

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小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)elisa試劑盒操作步驟

作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司 2016-04-05T00:00 (訪問量:7687)

??? 小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)elisa試劑盒操作步驟

??? 1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀

??? 釋。

??? 2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、

??? 待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

??? 3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

??? 4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

??? 5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

??? 6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

??? 7.溫育:操作同3。

??? 8.洗滌:操作同5。

??? 9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

??? 10分鐘.

??? 10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

??? 11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止

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