1:建系目的,含血清方案(重復容易,成本低)結合簡易單克隆法,克隆單細胞確保目的細胞,主單克隆群體增殖無影響(分出細胞在做鑒定)
2:避免外力(機械力,化學力)影響建系,國外樣本庫自動化研究已有案例介紹)
3:聚丙烯管進行進行細胞處理和分選,15%FBS+1640
4:可討論最佳溫度(4°C或15°C或室溫)
5:低俗離心(國外臨床樣本庫研究,沒有拿到具體數據),國內經驗談,1000轉(10分鐘內)
6:凍存復蘇:目前細工最優方案,DMSO8-10%+FBS40-90%,凍存前我司優化胰酶消化后成單個狀態,比吹打成單個活率大大提升。新型凍存液有一年以上凍存復蘇案例的,我們可配合免費推廣。
離心機研發生產廠家,納米磁珠分選免疫細胞研發生產廠家,路過可深入討論,要能共享FAQ,我們可共享驗證。
如流式告知型號,最佳培養基和細胞最佳濃度我們做些最佳方案推薦。
死細胞驗證:低濃度碘化丙啶(PI),鑒別染料7-AAD告知廠家貨號,我們統計下各廠家優略后,討論試公布參考結果。
自動化培養需冗余試劑配合,我司建系目的,技術老師路過多多支持。
二倍體建系考慮馬血請,豬血清方案的用戶,高質量及穩定貨源,我們試用建議做備份體系。痛點可提前討論。預實驗先行。
自動化樣本庫研究可討論細節。
自動化培養轉染細胞精準SOP,培養建系會容易很多,配套血替產品有以下資源,并有興趣可討論,我們負責全部技術層面開發,(類器官,雞胚液已有相關產品應用了)后期建系合作胚胎類血清替代品建系合作,(魚、雞、豬、羊,鼠)要有胚胎類大量生產資源,研發可討論,一種是國內該類應用備份,建系(科研先行,生產應用跟進種子庫建立。
20250119
冗余試劑設計,對抗不確定性
原代部分(特別是腫瘤細胞建系)-通用培養基合作推廣
驗證過程,各類難養系、原代部分(特別是腫瘤細胞建系)
各類難養系:難養系驗證比原方案培養預實驗更好,預實驗為啟,滿意結果為目的,在上原代應用,含血清建系為我司重點推廣目的,常規培養中問題可參考我司黑點、生長慢,不成瘤等。常規實驗:難轉染細胞,耐藥株建立,不成瘤細胞層面分析。
原代部分(特別是腫瘤細胞建系):通過PDX ,類器官首代,特別是腫瘤部分建系關難過,細工思路,先含血清基礎常用辦法,先得到充足細胞量,在驗證無血清方案更穩妥。
細工通用培養基優勢:TRANSWELL、類器官等一些兩種以上細胞培養,可行方案推廣與一起驗證細胞培養中痛點問題。實體組織肝我司已驗證完成,細節可以討論。
免疫類細胞科研驗證合作
免疫類細胞驗證合作:該類細胞從樣本庫研究、臨床研究、細胞系培養,細工都有些基礎培養中一些痛點統計,常規培養參考意義強,在驗證過程中冗余試劑與技術統計都會有些經驗參考,包括凍存復蘇統計活率更好也可用下細工方案做備份體系。
血液類離體處理細工推薦無外力影響培養,(避免機械力、鈍力、化學成份干擾)通用體系常規建議培養,再通過細工簡易單克隆方法,克隆目的細胞,可反復克隆,精準拿到拿到目的細胞。
轉染:目前大牌很多款都可順利轉染,解決成團成片是關鍵點
凍存復蘇:對原代免疫類研究,培養順利,轉染成功都相對容易,凍存復蘇細工推薦備份方案,在樣本庫研究,該類系保種都有積極意義。
首代培養難點:臨床檢驗科室,血液生化檢測設備廠家有合作的科研目的,可留言告知。相關科研合作。
類器官接種模型(人源化)共培養初步統計計劃:結合細胞系不成瘤模型,細工已開始從細胞培養階段到成瘤階段痛點統計,并給出提升細胞質量,共同合作完成相關熱點痛點統計。統計后在到臨床樣本不成瘤參考,人源化模型建議。細胞質量提升為基礎關鍵詞統計:細胞質量一致性,避免老幼狀態并存,空泡類問題,白點類問題,黑點類問題,生長慢問題,神經,膠質類,貼壁過緊,培養過程中錨著不牢(半懸半貼問題避免)成團成片解決辦法等。
相關產品介紹優勢
優化胰酶-細胞膜無損消化,驗證簡單,不怕消化過(長時間消化)在繼續培養比較,單細胞研究中提升細胞質量。同類無酶產品消化時間過長,特別是無血清培養體系難關是營養耗盡后,在經長時間消化,細胞容易正片粘連成團成糊狀特點,含血清方案建系也是我司極力推薦的建系先行方案原因。
增強貼壁試劑-特別是二維培養中,比傳統營養輔助試劑區別,解決成團成片,在難轉染系或原代,不容易成瘤細胞,耐藥株化學成分干擾后更容易成團成片,膜片鉗類應用膜無損優勢已在統計應用中,及上述痛點應用統計優勢,可詳盡討論與分享細工共享資料。
通用培養基:純國產備份體系,歡迎老師討論目的細胞可行性。
