培養(yǎng)基的基本要求
體外培養(yǎng)的細(xì)胞直接生活在培養(yǎng)基中,因此培養(yǎng)基應(yīng)能滿足細(xì)胞對(duì)營養(yǎng)成分、促生長因子、激素、滲透壓、pH等諸多方面的要求。
hyclone1640培養(yǎng)基,DMEM高糖培養(yǎng)基(010-57269780)
一、營養(yǎng)成分
細(xì)胞對(duì)營養(yǎng)條件一般包括以下幾個(gè)方面:
1 氨基酸:是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的原料。所有細(xì)胞都需要12種必須氨基酸:纈氨酸、亮、異亮、蘇、賴、色、苯丙、蛋、組、酪、精氨酸、胱氨酸。此外還需要谷氨酰胺,它在細(xì)胞代謝過程中有重要作用,所含的氮是核酸中票令和嘧啶合成的來源,同樣也是合成三、二、一磷酸酰苷所需要的基本物質(zhì)。
2 單糖:培養(yǎng)中的細(xì)胞可以進(jìn)行有氧與無氧酵解,六碳糖是主要能源。此外六碳糖也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原料。細(xì)胞對(duì)葡萄糖的吸收能力最高,半乳糖最低。
3 維生素:主要扮演輔酶、輔基的角色,必不可少。生物素、葉酸、煙酰胺、泛酸、吡哆醇、核黃素、硫胺素、維生素B12都是培養(yǎng)基常有的成分。
4 無機(jī)離子與微量元素:細(xì)胞生長除需要鈉鉀鈣鎂氮和磷等基本元素,還需要微量元素,如鐵、鋅、硒、銅、錳、鉬、釩等。
二、促生長因子及激素
gibco16000-044 胎牛血清,人血清(混合型),山羊血清(010-57269780)
越來越多的實(shí)驗(yàn)證實(shí)各種激素、生長因子對(duì)于維持細(xì)胞的功能、保持細(xì)胞的狀態(tài)(分化或未分化)具有十分重要的作用。有些激素對(duì)許多細(xì)胞生長有促生長作用,如胰島素,它能促進(jìn)細(xì)胞利用葡萄糖和氨基酸。有些激素對(duì)某一類細(xì)胞有明顯促進(jìn)作用,如氫化**松可促進(jìn)表皮細(xì)胞的生長,泌乳素有促進(jìn)乳腺上皮細(xì)胞生長作用等。
三、滲透壓
綿羊血清,長牛血清,驢血清,脫纖維綿羊血(010-57269780)
細(xì)胞必須生活在等滲環(huán)境中,大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞對(duì)滲透壓有一定耐受性。人血漿滲透壓290mOsm/kg, 可視為培養(yǎng)人體細(xì)胞的理想滲透壓。鼠細(xì)胞滲透壓在320mOsm/kg左右。對(duì)于大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞,滲透壓在260-320mOsm/kg的范圍都適宜。
四、pH
SV30087.01?南美胎牛血清?Hyclone?100ml
SV30087.02?南美胎牛血清?Hyclone?500ml(010-57269780)
大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2-7.4,偏離此范圍對(duì)細(xì)胞將產(chǎn)生有害影響,培養(yǎng)基應(yīng)具一定的緩沖能力。造成pH波動(dòng)主要是代謝產(chǎn)生的CO2,在封閉式培養(yǎng)過程中CO2與水結(jié)合產(chǎn)生碳酸,培養(yǎng)基pH很快下降。為解決這一問題,合成培養(yǎng)基中使用了NaHCO3-CO2緩沖系統(tǒng),并采用開放培養(yǎng)的方式,使細(xì)胞代謝產(chǎn)生的CO2及時(shí)溢出培養(yǎng)瓶,在通過穩(wěn)定調(diào)節(jié)溫箱中CO2濃度(5%),使之與培養(yǎng)基中的NaHCO3處于平衡狀態(tài)。
五、無毒、無污染
新生牛血清?自產(chǎn)?200ml/瓶
特級(jí)馬血清?自產(chǎn)?200ml/瓶
標(biāo)準(zhǔn)馬血清?自產(chǎn)?200ml/瓶
豚鼠血清?自產(chǎn)?100ml/瓶
大小鼠血清?自產(chǎn)?100ml/瓶
體外生長的細(xì)胞對(duì)微生物及一些有害有毒物質(zhì)沒有任何抵抗能力,因此培養(yǎng)基應(yīng)達(dá)到無化學(xué)物質(zhì)污染、無微生物污染(如細(xì)菌、真菌、支原體、病毒等)、無其他對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷作用的生物活性物質(zhì)污染(如抗體、補(bǔ)體)。對(duì)于天然培養(yǎng)基,污染主要來源于取材過程及生物材料本身,應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格選材,嚴(yán)格操作。對(duì)于合成培養(yǎng)基,污染主要來源于配制過程,配制所用的水,器皿應(yīng)十分潔凈,配制后應(yīng)嚴(yán)格過濾除菌。
