這些細(xì)胞培養(yǎng)好習(xí)慣和減少污染小細(xì)節(jié)，你做到了嗎？-null-資訊-生物在線

作者：北京索萊寶科技有限公司 2021-05-28T00:00 (訪問量:3804)

?保證細(xì)胞間的環(huán)境無菌與穩(wěn)定

首先保證工作環(huán)境干凈整潔，細(xì)胞間每周定期進(jìn)行紫外殺菌，每次30分鐘。細(xì)胞間內(nèi)保持穩(wěn)定的溫度、濕度及換氣。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中涉及的儀器，如：離心機(jī)、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀、倒置顯微鏡、冰箱等盡量放到細(xì)胞間使用，這樣可以保證和環(huán)境一起殺菌，保證儀器干凈整潔，不做其他實(shí)驗(yàn)使用。

將要使用的耗材提前放到細(xì)胞間內(nèi)，減少無關(guān)物品進(jìn)入細(xì)胞間。在實(shí)驗(yàn)過程中減少細(xì)胞間門的開關(guān)次數(shù)，保證環(huán)境無菌。

細(xì)胞培養(yǎng)前人和物的無菌準(zhǔn)備

準(zhǔn)備好純水要高壓滅菌后放到生物安全柜中，用來配制藥品試劑等。

抗生素提前配好，用過濾器過濾后分裝，放到-20℃冰箱中保存?zhèn)溆谩Ｒ部梢灾苯佑脦в锌股氐呐囵B(yǎng)基。

需要用的血清、胰酶要提前放到4℃冰箱中解凍。血清一般會放到-80℃保存，要逐步解凍，直接放到37℃解凍會出現(xiàn)絮狀物會影響后期使用。

操作前要把培養(yǎng)基、胰酶放到37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中復(fù)溫，減少低溫對細(xì)胞的刺激。

將本次實(shí)驗(yàn)需要使用的物品移液器、槍頭、移液管等提前放到生物安全柜中，打開紫外燈滅菌20-30分鐘。

進(jìn)入細(xì)胞間前要按順序進(jìn)行自身防護(hù)，在緩沖間換好、戴好：拖鞋、帽子、口罩、白大衣、手套。拖鞋和白大衣要是細(xì)胞間專用。

細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作的小細(xì)節(jié)

在操作前，先用酒精給手套消毒；打開生物安全柜，將工作臺用酒精棉球擦拭一遍，等酒精揮發(fā)后，進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)操作。

拿入到安全柜里面的物品都要用酒精噴灑消毒。

培養(yǎng)基、血清、胰酶等大包裝的試劑一定要進(jìn)行分裝到50mL、15mL離心管中使用，避免污染。如果不小心污染也不會浪費(fèi)大部分試劑。

觀察培養(yǎng)箱中的細(xì)胞，用顯微鏡觀察細(xì)胞生長密度、生長狀態(tài)，是否染菌。培養(yǎng)基的消耗情況，如出現(xiàn)培養(yǎng)基變黃表示細(xì)胞需要換液，培養(yǎng)基營養(yǎng)耗盡。

凡是在安全柜中打開的瓶子，用完要及時蓋好，避免污染。在瓶蓋打開過程中，盡量不要從其上方經(jīng)過，避免細(xì)菌掉入。

做完實(shí)驗(yàn)收拾工作臺，清理垃圾，物品歸位。用酒精擦拭工作臺，打開紫外燈照射20-30分鐘。

地址：北京市北京經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)環(huán)科中路16號26幢3層301

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