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鈣黃綠素是一種激發(fā)光波長(zhǎng)在495nm處，發(fā)射光波長(zhǎng)在515nm處的鈣離子熒光指示劑。，因?yàn)樗募?xì)胞毒性很低，所以鈣黃綠素常作為熒光探針去染活細(xì)胞的。
鈣黃綠素溶液配制
稱取0.2g射香草酚酞,1g鈣黃綠素及100g氯化鉀在玻璃研缽中研細(xì)混勻。
鈣黃綠素溶液染色原理
鈣黃綠素在其濃度大于100 mM時(shí)，鈣黃綠色熒光自我淬滅。它常被用做絡(luò)合物指示劑，用來滴定EDTA螯合的鈣離子，并且用熒光檢測(cè)法測(cè)定鈣離子濃度。它具有非常好的水溶性，其質(zhì)子 解離常數(shù)（酸度系數(shù)）pKa1=2。1， pKa2=2。9， pKa3=4。2， pKa4=5。5， pKa5=10。8和pKa6=11。7。Calcein-AM是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑，Calcein-AM由于在 Calcein（鈣黃綠素）的基礎(chǔ)上加強(qiáng)了疏水性，因此能夠輕易穿透活細(xì)胞膜。當(dāng)其進(jìn)入到細(xì)胞質(zhì)后，酯酶會(huì)將其水解為Calcein（鈣黃綠素）留在細(xì)胞 內(nèi)，發(fā)出強(qiáng)綠色熒光。