腦脊液樣本該如何收集與保存
如今，ELISA實(shí)驗(yàn)樣本已不僅僅局限于血清、血漿組織了，更多時(shí)候廣大科研者開(kāi)始提取腦脊液作為研究對(duì)象。那么，腦脊液該如何提取跟保存呢？如果您心中也帶著這個(gè)疑惑，請(qǐng)跟隨我司技術(shù)部王老師的腳步一起獲知其中的奧秘。
腦脊液的采集
1.狗、兔腦脊液的采集通常采取脊髓穿刺法：動(dòng)物輕度麻醉后，側(cè)臥位固定，使頭部及尾部向腰部盡量彎曲，剪去第七腰椎周?chē)谋幻Ｏ竞蟛僮髡咴趧?dòng)物背部用左手姆、食指固定穿刺部位的皮膚，右手持腰穿刺針垂直刺入，當(dāng)有落空感及動(dòng)物的后肢跳動(dòng)時(shí)，表明針已達(dá)椎管內(nèi)（ 蛛網(wǎng)膜下腔），抽去針芯,即見(jiàn)腦脊液流出。如果無(wú)腦脊液流出，可能是沒(méi)有刺破蛛網(wǎng)膜。輕輕調(diào)節(jié)進(jìn)針?lè)较蚣敖嵌龋绻X脊液流的太快，插入針芯稍加阻塞，以免導(dǎo)致顱內(nèi)壓突然下降而形成腦疝。
2.大鼠腦脊液的采集可采用枕大孔直接穿刺法
在大鼠麻醉后，頭部固定于定向儀上。頭頸部剪毛、消毒，用手術(shù)刀沿縱軸切一縱行切口（約2cm）用剪刀鈍性分離頸部背側(cè)肌肉。為避免出血，最深層附著在骨上的肌肉用手術(shù)刀背刮開(kāi)，暴露出枕骨大孔。由枕骨大孔進(jìn)針直接抽取腦脊液。抽取完畢逢好外層肌肉、皮膚。刀口處可撒些磺胺藥粉，防止感染。采完腦脊液后，應(yīng)注入等量的消毒生理鹽水，以保持原來(lái)腦脊髓腔的壓力。
腦脊液的保存條件
1.如果實(shí)驗(yàn)要求只是測(cè)定其中的蛋白含量的話，采集腦脊液后，離心1500g（左右）/10min（左右）。然后收集上清，分裝保存于液氮[最佳選擇]或-80度即可。（如果短時(shí)間內(nèi)就使用，-20度也可以，但能保存于-80度）。整個(gè)過(guò)程是冰上操作。
2.保存過(guò)程中，避免反復(fù)凍溶，防止蛋白降解。
腦脊液樣本該如何收集與保存！
作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司 2015-11-30T00:00 (訪問(wèn)量:16267)
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