單克隆抗體制備成功的要素之一:抗原要求及分類-技術前沿-資訊-生物在線

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單克隆抗體制備成功的要素之一:抗原要求及分類

作者:北京義翹神州科技有限公司 2020-08-19T18:56 (訪問量:11657)


抗原又稱作免疫原,是指能引起抗體生成的物質,能夠刺激機體免疫系統產生特異性抗體或致敏淋巴細胞。抗原具有免疫原性,能夠引起連續的免疫反應。

原則上任何可以誘發免疫反應的物質都可以做抗原,包括天然抗原和人工合成抗原,如蛋白質、多糖、脂類、核酸等。但是一個免疫原強的抗體應滿足以下的要求:

(1) 分子量足夠大。抗原決定簇一般有6-8個氨基酸殘基構成,平均5-10kD才會有一個抗原決定簇,因此分子量太小的多肽或蛋白難以形成一個抗原決定簇。

(2) 外源性要強。機體可以對自身物質形成免疫耐受,因此抗原和體內物質完全一樣或者相似就難以引起免疫應答,自然也就難以產生抗體了。

(3) 結構盡量復雜。越是結構簡單的物質,免疫原性越差。簡單重復的物質一般不具有免疫原性。

(4) 可降解性好。

抗原按照其來源一般可分為:

1. 純化的天然蛋白質

天然蛋白經過修飾,具有線性表位和結構表達,結構相對來說,比較復雜,屬于比較理想的抗原。但由于天然蛋白純化要求比較高,難以獲得高純度的天然蛋白,會影響免疫和抗體純化。因此一般只選擇在機體內表達量比較高的蛋白作為抗原。

2. 純化的重組蛋白

重組蛋白純化技術比較多,容易獲得高純度的蛋白,并且種類、結構容易檢測。選擇重組蛋白要清楚這些蛋白是否帶有標簽,因為為了方便純化重組蛋白,一般會添加一些標簽,比如GSTHisMycFcFlag等。這些帶標簽的抗原在免疫動物體內戶產品帶有標簽的抗體,需要在抗體純化過程中將這些標簽去掉。

3. 人工合成的多肽

合成的多肽可以在不同的區域作為抗原進行免疫。

4. 小分子物質

分子量大小一般不會超過1000 Da,但小于300 Da就難以獲得高親和力的抗體,因此常會鏈接載體后才會進行動物免疫。

5. 組織、全細胞或細胞組分

有時由于抗原靶點不清楚,會選擇組織、全細胞或細胞組分作為抗原進行動物免疫。如果以組織作為抗原,則需要切除新鮮的組織,用生理鹽水洗干凈,然后用濾網和研杵將其分離成單個細胞。

北京義翹神州科技股份有限公司是一家從事生物試劑研發、生產、銷售并提供技術服務的生物科技公司,主要業務包括重組蛋白、抗體、基因和培養基等產品,以及重組蛋白、抗體的開發和生物分析檢測等服務,為全球的藥品研發企業和生命科學研究機構提供高質量的生物試劑產品和高水平的技術服務。義翹神州的產品能夠覆蓋生命科學研究的多個領域,為分子生物學、細胞生物學、免疫學、發育生物學、干細胞研究等基礎科研方向和創新藥物研發提供“一站式”生物試劑產品和技術服務。

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