超氧化物歧化酶（SOD）活性檢測試劑盒-分析方法-資訊-生物在線

貨號：BC0170

規格：50T/24S

產品內容：

提取液：液體60mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：液體15 mL×1瓶，4℃保存；

試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存，用時加27mL蒸餾水配制成懸濁液，使用前充分搖勻；

試劑三：液體160μL×1支，4℃保存；

試劑四：液體11mL×1瓶，4℃保存。

試驗中所需的儀器和試劑：

可見分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水

產品說明：

SOD（EC 1.15.1.1）是一種廣泛存在于生物體內的金屬酶，是重要的氧自由基清除劑，能催化超氧化物陰離子發生岐化作用，生成H₂O₂和O₂。SOD不僅是超氧化物陰離子清除酶，也是H₂O₂主要生成酶，在生物抗氧化系統中具有重要作用。

通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應系統產生超氧陰離子(O₂^-)，O₂^-可還原氮藍四唑生成藍色甲臜，后者在560nm處有吸收；SOD可清除O₂^-，從而抑制了甲臜的形成；反應液藍色越深，說明SOD活性愈低，反之活性越高。

操作步驟：

一、樣品的前處理：???

1.?細菌或培養細胞：收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清，按照細菌或細胞數量（10⁴個）：提取液體積（mL）為500-1000:1 的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2.?組織：按照組織質量（g）：提取液體積（mL）為1:5-10 的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

3.?血清（漿）樣品：直接檢測。

二、測定步驟：

1.?分光光度計預熱30min以上，調節波長至560nm，蒸餾水調零。

2.?測定前將試劑一、二和四37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）水浴5min以上。

3.?樣本測定（在EP管中加入下列試劑）

4.?

試劑名稱

測定管

對照管

空白管1

空白管2

試劑一（μL）

240

試劑二（μL）

510

試劑四（μL）

180

樣?品?（μL）

蒸餾水（μL）

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