免疫組化常見問(wèn)題（精選）-分析方法-資訊-生物在線

固定液如何選擇？

固定液一般建議選擇4%的多聚甲醛或者10%的中性福爾馬林。但對(duì)于有些特殊組織比如眼球、脂肪等，有些公司有專門固定液，需要提前詢問(wèn)是否影響抗原。

選擇哪種抗原修復(fù)方法？

常用的修復(fù)方式為熱修復(fù)和胰蛋白酶消化修復(fù)，應(yīng)用熱修復(fù)時(shí)應(yīng)注意所用的緩沖溶液的pH值，常用pH值為檸檬酸鹽（pH 6.0）和EDTA（pH 9.0）。

在蛋白酶消化抗原修復(fù)中，按照我們的經(jīng)驗(yàn)，蛋白酶K效果最佳。

另外，抗原修復(fù)之前建議做一張HE染色，以檢測(cè)抗原（組織）結(jié)構(gòu)是否清晰、完整；有無(wú)人為損傷；脫蠟是否徹底等。具體選擇哪種抗原修復(fù)方法，請(qǐng)參考一抗說(shuō)明書。

一抗孵育條件如何選擇？

選擇4度過(guò)夜還是選擇37度一小時(shí)？建議根據(jù)抗體說(shuō)明書進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。如果說(shuō)明書中未提及，建議選擇4度過(guò)夜方式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

蠟塊及白片應(yīng)該如何儲(chǔ)存？

蠟塊可存放于室溫，如果條件允許也可存放于4度，注意防潮。白片的儲(chǔ)存對(duì)染色的影響目前尚不明確，因此最好的做法是在使用前新鮮制備玻片。如果白片必須存放，建議在4度進(jìn)行保存；不建議在存放前烘烤白片。

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