??改良吉姆薩染色液(Modified Giemsa Staining Solution)，也稱(chēng)瑞氏-吉姆薩染色液(Wright-Giemsa Staining Solution)，是用于細(xì)胞、血液、骨髓涂片或組織切片等樣品染色的染色液。根據(jù)細(xì)胞成分的化學(xué)性質(zhì)，改良吉姆薩染色液可將細(xì)胞質(zhì)染成粉紅色或藍(lán)色，將細(xì)胞核染成紫紅色或藍(lán)紫色。在光學(xué)顯微鏡下呈現(xiàn)出清晰的細(xì)胞及染色體圖像，便于對(duì)細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的觀察及異常變化的識(shí)別。
吉姆薩染色(Giemsa stain)，又稱(chēng)姬姆薩染色，是以德國(guó)化學(xué)家、細(xì)菌學(xué)家Gustav Giemsa的名字來(lái)命名的，最初是用于瘧疾病人體內(nèi)寄生蟲(chóng)的診斷，后由于對(duì)染色質(zhì)和細(xì)胞核膜的高質(zhì)量染色而用于組織病理學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)。吉姆薩染色對(duì)細(xì)胞質(zhì)著色較好，結(jié)構(gòu)顯示清晰，但細(xì)胞核著色較深，核結(jié)構(gòu)顯示不佳。吉姆薩染色原理和結(jié)果與瑞氏染色基本相同，而改良吉姆薩染色法是將吉姆薩染色法與瑞氏染色法結(jié)合，兼顧二者之長(zhǎng)，使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核均能獲得滿意的染色效果。改良吉姆薩染色液、吉姆薩染色液和瑞氏染色液三種染色液的比較如下：
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 改良吉姆薩染色液(20X) | 吉姆薩染色液(10X) | 瑞氏染色液 |
| 產(chǎn)品編號(hào) | C0131 | C0133 | C0135 |
| 主要成分 | 天青B、天青II-伊紅、亞甲基藍(lán) | 天青II和伊紅 | 亞甲基藍(lán)和伊紅 |
| 細(xì)胞質(zhì)顏色 | 粉紅色或藍(lán)色 | 粉紅色或藍(lán)色 | 粉紅色或藍(lán)色 |
| 細(xì)胞核顏色 | 紫紅色或藍(lán)紫色 | 紫紅色或藍(lán)紫色 | 紫紅色 |
| 特點(diǎn) | 將吉姆薩染色和瑞氏染色結(jié)合起來(lái)，彌補(bǔ)了兩者各自的缺點(diǎn) | 對(duì)細(xì)胞質(zhì)著色力較強(qiáng)，但細(xì)胞核著色較深，細(xì)胞核結(jié)構(gòu)顯示不佳 | 細(xì)胞質(zhì)及其中顆粒染色較好，但細(xì)胞核染色質(zhì)及核膜的結(jié)構(gòu)不是很清晰 |
| 用途 | 主要用于細(xì)胞、血液、骨髓涂片或組織切片的染色 | 主要用于染色體顯帶、寄生蟲(chóng)和血細(xì)胞的染色 | 主要用于血細(xì)胞的染色 |
改良吉姆薩染色液的主要成分是天青B (azure B)、天青II-伊紅(azure II-eosin)和亞甲基藍(lán)(methylene blue)。其中天青B是一種堿性染料(陽(yáng)離子染料)，常用于染色體或核酸的染色；伊紅是酸性染料(陰離子染料)，是以氧雜蒽和醌式苯環(huán)作為生色基團(tuán)，以羧基(-COOH)為助色基團(tuán)的染料；亞甲基藍(lán)是堿性染料(陽(yáng)離子染料)，生色基團(tuán)包括偶氮基(-N＝N-)等。染色原理是基于在酸性染料中具有染色作用的陰離子與細(xì)胞內(nèi)的堿性物質(zhì)相結(jié)合，而堿性染料中具有染色作用的陽(yáng)離子與細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)相結(jié)合。各種細(xì)胞成分化學(xué)性質(zhì)不同，對(duì)各種染料的親和力也不一樣。細(xì)胞核蛋白主要與天青II和伊紅形成的化合物結(jié)合，使細(xì)胞核呈紫紅色。在對(duì)紅細(xì)胞染色時(shí)，原始紅細(xì)胞、早幼紅細(xì)胞胞質(zhì)、核仁含較多酸性物質(zhì)，被染成較濃厚的藍(lán)色；中幼紅細(xì)胞既含酸性物質(zhì)，又含堿性物質(zhì)，被染成紅藍(lán)色或灰紅色；完全成熟的紅細(xì)胞，酸性物質(zhì)徹底消失后，被染成粉紅色。對(duì)于白細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)染色時(shí)，則分為以下幾種情況：嗜酸性粒細(xì)胞中的嗜酸性顆粒與酸性染料伊紅結(jié)合，被染成粉紅色；嗜堿性粒細(xì)胞中的嗜堿性顆粒與堿性染料亞甲基藍(lán)或天青B結(jié)合，被染成藍(lán)紫色；中性粒細(xì)胞細(xì)胞中的中性顆粒與伊紅、亞甲基藍(lán)和天青均可結(jié)合，被染成淡紫紅色。此外單核細(xì)胞或淋巴細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)含有酸性蛋白質(zhì)，被染成藍(lán)紫色或紫紅色。各類(lèi)成分由于自身特性與改良吉姆薩染液中不同物質(zhì)結(jié)合呈現(xiàn)不同顏色從而得以區(qū)分。在對(duì)其它細(xì)胞染色時(shí)，代謝旺盛的細(xì)胞胞質(zhì)含較多蛋白質(zhì)呈酸性，因此與天青II和伊紅形成的化合物結(jié)合呈粉紅色。血細(xì)胞在本染色液染色后的細(xì)胞質(zhì)顏色見(jiàn)下表：
| 血細(xì)胞類(lèi)型 | 細(xì)胞質(zhì)顏色 |
| 成熟紅細(xì)胞(Mature red blood cells) | 粉紅色 |
| 嗜酸性粒細(xì)胞(Eosinophils) | 粉紅色 |
| 嗜堿性粒細(xì)胞(Basophils) | 藍(lán)紫色 |
| 中性粒細(xì)胞(Neutrophils) | 淡紫紅色 |
| 單核細(xì)胞(Monocytes)、淋巴細(xì)胞(Lymphocytes) | 藍(lán)紫色或紫紅色 |
本產(chǎn)品染色效果好、染色力強(qiáng)、著色清晰。本產(chǎn)品用于HeLa細(xì)胞的染色效果參考圖1。
圖1.改良吉姆薩染色液與國(guó)外知名的S品牌相同產(chǎn)品的染色效果對(duì)比圖。A. 改良吉姆薩染色液用于HeLa細(xì)胞的染色效果。B. S品牌的改良Giemsa染色液用于HeLa細(xì)胞的染色效果。如圖所示，改良吉姆薩染液染色后HeLa細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)呈現(xiàn)藍(lán)紫色，細(xì)胞核呈現(xiàn)紫紅色。改良吉姆薩染色液染色效果與S品牌同類(lèi)產(chǎn)品的染色效果基本一致。注：實(shí)際實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能會(huì)因樣品及實(shí)驗(yàn)條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。
本產(chǎn)品以無(wú)水乙醇為溶劑，與傳統(tǒng)的甲醇溶解法相比，提高了使用的安全性。
按推薦稀釋倍數(shù)配制染色工作液(1X)，且每樣使用1ml染色工作液(1X)計(jì)算，此時(shí)本試劑盒的100ml和500ml包裝分別可以檢測(cè)2000個(gè)和10000個(gè)樣品。
包裝清單：
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 包裝 |
| C0131-100ml | 改良吉姆薩染色液(20X) | 100ml |
| C0131-500ml | 改良吉姆薩染色液(20X) | 500ml |
| — | 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
保存條件：
室溫避光保存，至少兩年有效。
注意事項(xiàng)：
血液涂片或骨髓涂片應(yīng)厚薄均勻，以免影響染色和拍照。
本染色液在稀釋后應(yīng)有類(lèi)似金屬光澤，否則染色液可能已失效。
本染色工作液應(yīng)保持中性，尤其是用于稀釋的PBS。在酸性環(huán)境下，細(xì)胞質(zhì)蛋白正電荷增多，易被伊紅染成紅色；在堿性環(huán)境下，細(xì)胞質(zhì)蛋白負(fù)電荷增多，易被亞甲基藍(lán)染成藍(lán)色。酸性或堿性環(huán)境都會(huì)造成染色異常，以致識(shí)別困難，影響正確判斷。推薦使用PBS (C0221A)或PBS (10X) (ST476)。
吉姆薩染色液對(duì)人體有毒性，且易燃。操作時(shí)請(qǐng)?zhí)貏e小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說(shuō)明：
1.試劑的準(zhǔn)備工作
改良吉姆薩染色工作液(1X)的配制：根據(jù)樣品數(shù)量，取適量改良吉姆薩染色液(20X)，加入PBS或雙蒸水稀釋20倍即成改良吉姆薩工作液(1X)。例如1ml改良吉姆薩染色液(20X)加入19ml PBS，混合均勻，即得20ml改良吉姆薩染色工作液(1X)。注：稀釋后的改良吉姆薩染色工作液(1X)為即用型試劑，不宜保存，應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配，以免影響染色效果。
2.樣品處理
a.對(duì)于石蠟切片：
二甲苯中脫蠟5-10分鐘。
換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘。
無(wú)水乙醇5分鐘。
90%乙醇2分鐘。
80%乙醇2分鐘。
70%乙醇2分鐘。
b.對(duì)于冰凍切片：
蒸餾水洗滌2分鐘。
c.對(duì)于血液或骨髓涂片：
按照常規(guī)方法制作血涂片或骨髓涂片，自然晾干。
70%乙醇固定10分鐘。
d.對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞：
加入70%的乙醇固定10分鐘。
3.改良吉姆薩染色
a.切片或涂片樣品加入適量配制好的改良吉姆薩染色工作液(1X)染色45分鐘。注：如果染色過(guò)深或過(guò)淺應(yīng)調(diào)整染色時(shí)間或工作液濃度。
b.用蒸餾水從一側(cè)充分洗滌，干燥后即可在顯微鏡下觀察和拍照。?