文章源自徠卡
?
??
?
前言：制備高質(zhì)量的病理切片需要一定的技巧和經(jīng)驗—但我們都須從頭開始學(xué)習(xí)。
?
該教程的目的是協(xié)助初學(xué)者熟悉石蠟切片的制備，以及作為經(jīng)驗更豐富的技術(shù)專家的進(jìn)修課程。涵蓋輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)制備石蠟切片的設(shè)置和操作相關(guān)的基本內(nèi)容。同時對切片過程中的部分常見故障進(jìn)行具體說明，并提供故障排除建議。
?
?
01 正確固定標(biāo)本
?
?
固定是組織學(xué)標(biāo)本制備技術(shù)中最重要的一步。即使在對組織標(biāo)本進(jìn)行處理和切片的過程中做到了很細(xì)致,但只有當(dāng)組織被及時且充分固定時，才能顯示出組織基本形態(tài)的細(xì)節(jié)。
?
?
1）通常情況下,相比于固定良好的標(biāo)本,未進(jìn)行良好固定的標(biāo)本在切片時可能存在問題。
?
2）對于未能良好固定的組織,即使采用最優(yōu)化處理方法并仔細(xì)切片,還是有可能得到質(zhì)量較差的形態(tài)學(xué)結(jié)果。
?
?
02 正確處理組織
?
?
采用適當(dāng)?shù)姆椒▽σ蚜己霉潭ǖ臉?biāo)本進(jìn)行合理的處理,才能獲得良好的組織切片。
?
?
1）標(biāo)本處理不足(標(biāo)本太大、處理時間過短)或處理過度(對于標(biāo)本的大小和性質(zhì)而言,處理的時間過長)。這兩種情況均可能導(dǎo)致難以切片或者不能切片。
?
2）目前有多種技術(shù)可用于從問題蠟塊中獲取切片
3）如果蠟塊因組織較硬或易碎而難以進(jìn)行切片,可將其暴露面浸于冷水或柔軟劑(弱洗滌劑溶液、織物柔軟劑或 Mollifex)中。
?
4)對于含鈣標(biāo)本,將表面脫鈣劑應(yīng)用于暴露組織10分鐘或更長時間)可以獲得幾張切片。在將蠟塊置入切片機(jī)標(biāo)本架之前應(yīng)對蠟塊進(jìn)行良好漂洗和再切片,因為即使痕量的脫鈣劑亦將損壞刀片架的壓盤。
?
5)推薦采用石蠟?zāi)z帶-傳輸系統(tǒng)從困難蠟塊(固定、處理或浸潤錯誤)獲取切片,因為正常的切片方法不能成功獲得切片。
?
6)如果在處理過程中第一時間末對標(biāo)本進(jìn)行充分處理,而導(dǎo)致不能從蠟塊中獲取切片,那么可以對標(biāo)本進(jìn)行再處理。
??
?
該胰腺蠟塊未進(jìn)行充分固定，因此根據(jù)固定時間不夠的處理方案進(jìn)行再處理。該圖所示為處理不足的典型案例，即導(dǎo)致標(biāo)本在周圍石蠟中出現(xiàn)相當(dāng)大的收縮。組織柔軟且呈糊狀因此不能進(jìn)行切片，需要進(jìn)行再處理。
?
?
03 仔細(xì)包埋標(biāo)本
?
?
嵌入是非常重要的一步,需要一個成熟的方案。包埋不細(xì)致可能導(dǎo)切片更加困難。
?
?
1)避免包埋盒填充不足，因為這可能導(dǎo)致切片機(jī)夾持不穩(wěn)定，從而導(dǎo)致切片“厚薄不均”等現(xiàn)象。
?
2)避免過度填充包埋盒，因為其可影響蠟塊切面的正確對齊。
3)在夾持之前，應(yīng)去除包埋盒之外存在的多余石蠟，以確保蠟塊在切片過程中的穩(wěn)定性。
4)標(biāo)本的定位非常重要。
?
?
?
?
?
填充不足(左)、填充過度(右)以及包埋盒正確填充(中)示意圖。包埋盒填充不足和填充過度均可導(dǎo)致切片過程中出現(xiàn)問題。
?
?
04 正確定位切片機(jī)
?
?
實驗室中切片機(jī)的位置非常重要。
?
?
1)將切片機(jī)置于穩(wěn)定工作臺上,并且應(yīng)遠(yuǎn)離通風(fēng)口、門口和員工通道。來自空調(diào)的任何空氣流動或其他原因均可導(dǎo)致切片操作非常困難。
?
2)首選高度可調(diào)的工作臺以及符合人體工程學(xué)的椅子。
?
?
??
?
北京昊諾斯科技有限公司 商家主頁
地 址： 北京市朝陽區(qū)小營路17號一幢金盟大廈五層5-503室
聯(lián)系人： 王女士
電 話： 010-64838766-237
傳 真： 010-64842431/64838766/64838775-249
Email：wangqian@herosbio.com