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??? 人甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：

??? 本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）表達(dá)。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，可與樣品中甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中人甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）的存在與否。

??? 人甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）ELISA試劑盒操作步驟：

??? 1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）

??? 2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照50μl。然后在待測(cè)樣品孔先

??? 加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，

??? 3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

??? 4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

??? 5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

??? 6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

??? 7.溫育：操作同3。

??? 8.洗滌：操作同5。

??? 9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

??? 10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

??? 11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

??? 人甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）ELISA試劑盒計(jì)算和結(jié)果判定：

??? 試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照孔平均值≥1.00;陰性對(duì)照平均值≤0.10臨界值（CUTOFF）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15陰性判定：樣品OD值<臨界值（CUTOFF）者為人甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）陰性陽(yáng)性判定：樣品OD值≥臨界值（CUTOFF）者為人甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）陽(yáng)性。人甲型流感病毒抗原（FluA-Ag）ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理 人ELISA試劑盒 遠(yuǎn)慕生物 ELISA檢測(cè)試劑盒?