BrdU 細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑-技術(shù)前沿-資訊-生物在線

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BrdU 細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑

作者:西安百螢生物科技有限公司 2018-10-08T08:53 (訪問量:6863)

基本信息

貨號(hào):1703025 mg

儲(chǔ)存方式:-20℃避光

結(jié)構(gòu)式:

分子量:307.09

外觀:白色

儲(chǔ)存:DMSO

生物應(yīng)用

5--2-脫氧尿苷(BrdU)是胸苷的類似物,可以摻入新合成的復(fù)制細(xì)胞DNAS期細(xì)胞)中。 BrdU通常用于檢測(cè)活組織中的增殖細(xì)胞。 它通過在DNA復(fù)制過程中取代胸苷并將其自身整合到新合成的DNA中(在S期期間)起作用。 然后可以使用對(duì)BrdU特異的抗體來檢測(cè)摻入的化學(xué)物質(zhì),從而指示活躍地復(fù)制其DNA的細(xì)胞。 因?yàn)?/font>BrdU可以在細(xì)胞分裂的S期中替代胸苷,它可以引起突變。

染色細(xì)胞樣本分析

以下程序適用于大多數(shù)細(xì)胞類型。生長(zhǎng)培養(yǎng)基,細(xì)胞密度,其他細(xì)胞類型的存在和其他因素可能影響Brdu摻入。

1)。 制備1-10mM DMSO儲(chǔ)備溶液。 如果儲(chǔ)存在-20°CDMSO儲(chǔ)備溶液可以使用6個(gè)月。

2)。 通過離心沉淀細(xì)胞并將細(xì)胞重懸于完全生長(zhǎng)的培養(yǎng)基中。 培養(yǎng)物中的貼壁細(xì)胞可以在蓋玻片上或細(xì)胞培養(yǎng)孔中原位染色。

3)。 使用520μM之間的濃度添加Brdu染色,并將其孵育60分鐘至過夜。 最佳孵育時(shí)間取決于細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)。

4)。 用70-80%酒精或酸 - 乙醇固定細(xì)胞20-30分鐘。

5)。用PBS洗滌(3次,每次2分鐘)。

6)。 繼續(xù)進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色。

參考文獻(xiàn)

1. Zeng Y, Wang Y. (2006) Sequence-dependent formation of intrastrand crosslink products from the UVB irradiation of duplex DNA containing a 5-bromo-2'-deoxyuridine or 5- bromo-2'-deoxycytidine. Nucleic Acids Res.

2. Kuwagata M, Ogawa T, Nagata T, Shioda S. (2006) The evaluation of early embryonic neurogenesis after exposure to the genotoxic agent 5-bromo-2'-deoxyuridine in mice. Neurotoxicology.

3. Sahambi SK, Hales BF. (2006) Exposure to 5-bromo-2'-deoxyuridine induces oxidative stress and activator protein-1 DNA binding activity in the embryo. Birth Defects Res A Clin Mol Teratol, 76, 580.

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