??? IsoPlexis單細胞蛋白組學檢測技術(shù)證明了，利用表達IL-12和PD-L1阻斷蛋白的組合基因工程腺病毒感染間充質(zhì)干細胞(CAd12_PD-L1 MSCs)促進了HER.2-CAR-T細胞的腫瘤抗原特異性多功能性，并且該多功能性與CAR-T細胞在體外和體內(nèi)抗腫瘤活性增強相關(guān)。
??? 單細胞多重蛋白組學技術(shù)也揭示了HER.2 CAR-T細胞的多功能性增加對腫瘤抗原的反應增強，CAd12_PD-L1骨髓間充質(zhì)干細胞治療組中有34%的CD4+和40%的CD8+CAR-T多功能性細胞，而HER.2 CAR-T單一治療組中僅有5%的CD4+和16%的CD8+CAR-T多功能性細胞。
??? 當腫瘤細胞和CAd12_PD-L1間充質(zhì)干細胞MSC載體共培養(yǎng)時，多功能CD4+HER.2 CAR-T細胞顯示出共同分泌IFN-g、顆粒酶B和CCL11的大多數(shù)細胞因子的特征，而多功能CD8-HER.2 CAR-T細胞與IFN-g、顆粒酶B、TNF-a和穿孔素共同分泌具有更大的細胞溶解活性，這解釋了CAd12_PD-L1 MSCs提高體內(nèi)HER.2 CAR-T細胞抗腫瘤活性相關(guān)機制。
??? IsoPlexis單細胞功能蛋白質(zhì)組學技術(shù)為CAd12_PD-L1 MSC在增強HER.2 CAR-T細胞多功能性和效應細胞因子方面提供了獨特的機制見解，并證明了溶瘤免疫療法與CAR-T細胞療法的聯(lián)合治療在促進抗腫瘤功能方面的方法學和效果。
腫瘤微環(huán)境 (TME) 的復雜性可以限制CAR-T細胞的浸潤，并為使用過繼細胞療法治療實體瘤設(shè)置障礙。TME會產(chǎn)生免疫抑制蛋白、細胞因子和趨化因子，從而抑制細胞毒性T細胞反應。因此，確認可破壞TME同時促進T細胞持久性功能驅(qū)動因素的療法是實體瘤治療的一個重要目標?；诠こ袒俨《?/span> (OAd) 的溶瘤免疫療法可破壞TME并刺激相關(guān)CAR-T細胞，增強宿主抗腫瘤免疫反應。但是溶瘤病毒如何遞送到相應病灶內(nèi)的腫瘤部位極具挑戰(zhàn)性，而且由于患者對病毒治療的天然或適應性免疫反應，在某些情況下無法進行靜脈給藥。為了克服這些挑戰(zhàn)，利用特定細胞載體系統(tǒng)如間充質(zhì)干細胞 (MSC) 可將OAd遞送至腫瘤部位。最近發(fā)表在Molecular Therapy上的一項研究通過IsoPlexis的單細胞蛋白質(zhì)組學技術(shù)證實了OAd細胞遞送聯(lián)合CAR-T療法在治療實體瘤方面的方法學及效果。
利用功能性單細胞蛋白質(zhì)組學技術(shù)解決溶瘤免疫療法破壞腫瘤微環(huán)境的挑戰(zhàn)
McKenna等科學家在研究中使用間充質(zhì)干細胞(MSCs)系統(tǒng)的遞送包含OAd和輔助性腺病毒(HDAd) 并表達白介素-12(IL-12)和PD-L1(程序性死亡配體1)阻斷蛋白的組合載體[CAd]。CAd感染的MSCs可以遞送并釋放有功能的病毒感染和裂解肺腫瘤細胞，同時通過釋放IL-12和PD-L1阻斷蛋白增強CAR-T細胞抗腫瘤活性。這種方法與靶向HER2特異性CAR-T細胞療法的結(jié)合可在體外消除3D培養(yǎng)的腫瘤球體，并且在體內(nèi)觀察到抑制了兩種原位肺癌模型的腫瘤生長。與單一CAR-T細胞治療相比，組合載體CAd通過間充質(zhì)干細胞MSCs遞送療法增加了人T細胞的總體數(shù)量，并增強了其多功能細胞因子的分泌。
單細胞分泌蛋白質(zhì)組學鑒定與CAd感染的骨髓間充質(zhì)干細胞治療的CAR-T細胞抗腫瘤功能改善相關(guān)的上調(diào)T細胞多功能性
研究中也提到IsoPlexis的功能蛋白質(zhì)組學技術(shù)來分析CAd感染的MSC提高HER.2 CAR-T細胞功效的機制。單細胞分泌組芯片用于測量單個CAR-T細胞的多功能性。在以前的研究中，多功能性與抗腫瘤活性有關(guān)，并可以很好預測臨床結(jié)果。IsoPlexis單細胞分泌蛋白質(zhì)組學技術(shù)發(fā)現(xiàn)CAd-MSC與腫瘤細胞系共培養(yǎng)的HER2 CAR-T細胞相比未經(jīng)CAd-MSC共同培養(yǎng)的CAR-T細胞具有更多的多功能性T細胞（分別占CD4+和CD8+細胞的34%和40% VS 5%和16%）。
聯(lián)合治療通過增加CAR-T細胞中多功能細胞的數(shù)量有效地增強了HER.2 CAR-T細胞的抗腫瘤活性。
在IsoSpeak軟件對相關(guān)細胞亞群進行進一步分析中發(fā)現(xiàn)，與未感染Ad的MSCs共培養(yǎng)的一部分CD4+細胞主要分泌IL-8，而與CAd MSCs共培養(yǎng)的一個CD4+細胞亞群中細胞分泌多達9種細胞因子，其中大部分同時分泌IFN-g、Granzyme B和CCL11。CAd MSCs促進了CD4+CAR-T細胞對腫瘤細胞的促炎細胞因子的產(chǎn)生。在CD8+CAR-T細胞亞群中則發(fā)現(xiàn)CD8+HER.2 CAR-T細胞分泌相關(guān)效應因子的增多，包含INF-g，Granzyme B，MIP-a等。經(jīng)CAd MSCs處理的CD4+和CD8+CAR-T細胞均顯示CCL11的分泌增多（CCL11是一種與粘附分子和T細胞趨化性增加相關(guān)的趨化因子）。IsoPlexis功能性單細胞蛋白質(zhì)組學技術(shù)揭示了CAd MSCs增強CAR-T細胞功效的抗腫瘤活性相關(guān)機制。
這種抗腫瘤活性在隨后的小鼠肺癌模型中的實驗結(jié)果一致，利用IsoPlexis技術(shù)可以在更短的時間內(nèi)利用體外3D細胞培養(yǎng)模型提供與體內(nèi)生物學反應相一致的結(jié)果和見解。CAd-MSCs治療聯(lián)合HER.2 CAR-T治療與單獨CAR-T治療相比，能夠顯著抑制腫瘤生長。肺部腫瘤內(nèi)T細胞數(shù)據(jù)顯示，與單一CAR-T治療組相比，CAd-MSC聯(lián)合CAR-T治療細胞組中CD8+T細胞的耗竭標志物Tim3的表達降低，表明CAd-MSC促進了T細胞的持久性。使用異種移植肺腫瘤模型進行的小鼠體內(nèi)研究得出的結(jié)果與3D培養(yǎng)細胞中結(jié)果相一致：聯(lián)合治療實現(xiàn)腫瘤在2周內(nèi)完全清除，且未觀察到任何負面作用。
總結(jié)McKenna等人的研究結(jié)果揭示了CAd-MSCs和CAR-T獨特的聯(lián)合療法的抗腫瘤活性內(nèi)在機制。聯(lián)合治療可破壞TME，改善T細胞浸潤，增強T細胞的多功能性，而多功能性與抗腫瘤活性相關(guān)。IsoPlexis通過IsoCode單細胞分泌蛋白組芯片
地 址： 暫無 聯(lián)系人： 苗先生 電 話： 4001118515 傳 真： 暫無 Email：Info.apac@isoplexis.com
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