? ? ? 過(guò)去,研究者使用傳統(tǒng)顯微鏡進(jìn)行細(xì)胞示蹤或形態(tài)分析,會(huì)面臨種種困難和不便。首先,研究人員需要給細(xì)胞提供合適的培養(yǎng)環(huán)境以保持細(xì)胞在觀察過(guò)程中的健康狀態(tài)。在傳統(tǒng)應(yīng)用領(lǐng)域,通常通過(guò)在傳統(tǒng)顯微鏡上加載活細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)來(lái)實(shí)現(xiàn)活細(xì)胞的連續(xù)觀察。而這種活細(xì)胞觀測(cè)系統(tǒng)價(jià)格非常昂貴。其次,如果實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有能夠自動(dòng)成像的顯微鏡,用戶還需要在特定的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行反復(fù)的開(kāi)機(jī)、調(diào)焦、拍照、關(guān)閉光源等無(wú)聊的步驟。如果是過(guò)夜運(yùn)行,此過(guò)程將更加繁瑣。再次,就算是實(shí)驗(yàn)室平臺(tái)有高級(jí)的自動(dòng)化活細(xì)胞成像系統(tǒng),用戶也會(huì)經(jīng)常面臨使用時(shí)間受限及實(shí)驗(yàn)時(shí)間沖突等問(wèn)題。
? ? ? 由美國(guó)Etaluma公司開(kāi)發(fā)設(shè)計(jì)的LumaScope細(xì)胞成像系統(tǒng),能夠很好解決用戶的上述困擾,輕松實(shí)現(xiàn)細(xì)胞示蹤或形態(tài)學(xué)研究。通過(guò)結(jié)構(gòu)優(yōu)化,LumaScope緊湊的結(jié)構(gòu)、多色自動(dòng)化成像、抗高濕度環(huán)境等特性,使得它成為了實(shí)驗(yàn)室活細(xì)胞成像研究的利器。而且LumaScope平臺(tái)式的載物臺(tái)設(shè)計(jì),可以兼容玻片、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶和多孔板等各種細(xì)胞培養(yǎng)容器。
一、材料與設(shè)備:
l 細(xì)胞、培養(yǎng)容器和培養(yǎng)基質(zhì);
l CO2培養(yǎng)箱
l LumaScope成像系統(tǒng);
l Image J軟件(帶Mtracking插件);
二、實(shí)驗(yàn)程序:
1、 用75%乙醇對(duì)LumaScope主機(jī)及USB數(shù)據(jù)線進(jìn)行清潔和消毒;
2、 將LumaScope主機(jī)放入CO2培養(yǎng)箱中,并通過(guò)USB線連接至控制電腦;
3、 將培養(yǎng)容器放在LumaScope載物臺(tái)上;
4、 打開(kāi)Lumaview軟件,調(diào)節(jié)聚焦旋鈕與載物臺(tái),找到目標(biāo)區(qū)域;
5、 設(shè)置Time lapse成像功能參數(shù)(此類實(shí)驗(yàn)建議成像時(shí)間間隔為20~30min);
6、 啟動(dòng)Time lapse功能(此過(guò)程中用戶不需要守在儀器旁邊);
7、 程序自動(dòng)結(jié)束,可在電腦上通過(guò)Image J軟件來(lái)分析細(xì)胞示蹤數(shù)據(jù);
三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
LumaScope成像系統(tǒng)能夠在用戶所設(shè)定的時(shí)間節(jié)點(diǎn)進(jìn)行自動(dòng)化的成像并保存到控制的電腦上。使用Image J軟件打開(kāi)圖像文件,生成一個(gè)新的圖像棧(image stack)。利用Mtracking 功能逐個(gè)進(jìn)行細(xì)胞示蹤分析。
最后,用戶可輕松的獲得單個(gè)細(xì)胞的示蹤或形態(tài)數(shù)據(jù)。Mtracking還可生成單個(gè)細(xì)胞的相對(duì)excel數(shù)據(jù)。
四、結(jié)論
LumaScope系統(tǒng)是活細(xì)胞研究的絕佳利器。它獨(dú)特的設(shè)計(jì)能夠放入各種細(xì)胞培養(yǎng)箱并克服高溫、高濕環(huán)境。此外,CO2培養(yǎng)箱比其他培養(yǎng)系統(tǒng)所提供的培養(yǎng)環(huán)境精度更高和穩(wěn)定性更好。用戶還可使用熒光標(biāo)記分析目的蛋白表達(dá)或細(xì)胞分析,而不需要改變?nèi)魏闻囵B(yǎng)條件。LumaScope搭配Image J軟件可輕松實(shí)現(xiàn)單個(gè)細(xì)胞的示蹤或形態(tài)研究,而且在成本上比升級(jí)顯微鏡更為經(jīng)濟(jì)實(shí)惠。
LumaScope顯微鏡產(chǎn)品詳細(xì)信息可瀏覽:
Etaluma公司網(wǎng)頁(yè)http://etaluma.com/products/lumascope
吉泰公司網(wǎng)頁(yè)http://www.genetimes.com.cn/product/inst.aspx
