傳統(tǒng)的穩(wěn)定株篩選有兩種主要方式:
線性化質(zhì)粒篩選單克隆穩(wěn)定株和慢病毒感染細(xì)胞篩選混合穩(wěn)定株。這兩種常用的方法都有嚴(yán)重的缺陷,質(zhì)粒篩選穩(wěn)定株的周期長(zhǎng),效率低,整合位點(diǎn)不確定,需要一直使用抗生素維持，容易導(dǎo)致非正常的細(xì)胞表型. 慢病毒篩選穩(wěn)定株周期較短，但是整合位點(diǎn)不確定且集中與一些高表達(dá)的熱點(diǎn)區(qū)域，需要一直使用抗生素維持，同時(shí)慢病毒載體攜帶的病毒基因?qū)?xì)胞正常生理功能影響巨大。這些缺點(diǎn)使這兩種方式篩選到的穩(wěn)定細(xì)胞株不能有效的代表外源整合基因的生物學(xué)功能，造成一些實(shí)驗(yàn)上的假象，使實(shí)驗(yàn)結(jié)論沒(méi)有說(shuō)服力。
和元生物人源細(xì)胞的AAVS1位點(diǎn)整合自推出以來(lái)受到廣大客戶的認(rèn)可，現(xiàn)在又成功建立小鼠和大鼠來(lái)源細(xì)胞的定點(diǎn)整合穩(wěn)定株服務(wù)平臺(tái)。
和元生物的優(yōu)勢(shì):
- 外源基因的表達(dá)穩(wěn)定可靠
- 不影響細(xì)胞正常生理功能
- 整合位點(diǎn)明確，遺傳背景清晰
- 穩(wěn)定傳代,無(wú)需抗生素維持
- 可操作細(xì)胞種屬?gòu)V泛,可全面應(yīng)用于人,小鼠,大鼠細(xì)胞
- 細(xì)胞示蹤
