BiomicV3微生物鑒定儀是由美國(guó) Giles scientific公司生產(chǎn)的,利用數(shù)字成像技術(shù)進(jìn)行微生物檢驗(yàn)的專用設(shè)備。該設(shè)備可讀取市面上最常見(jiàn)的三種鑒定卡:API (bioMerieux), Crystal (BD) and RapID (Remel),進(jìn)行微生物鑒定。

為了保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需要在安裝調(diào)試階段對(duì)鑒定結(jié)果進(jìn)行有效質(zhì)控,下面以梅里埃鑒定卡 API 20E為例,說(shuō)明 Biomic V3的質(zhì)控流程。
我們知道,培養(yǎng)基、鑒定卡、試劑、操作與環(huán)境等條件都對(duì)鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響。在確定以上因素都適合的情況下,即可利用標(biāo)準(zhǔn)菌株,進(jìn)行質(zhì)控試驗(yàn)對(duì)軟件進(jìn)行調(diào)試,使得鑒定結(jié)果準(zhǔn)確無(wú)誤。
此次我們采用的標(biāo)準(zhǔn)菌株包括大腸桿菌,沙門氏菌和阪崎腸桿菌,這三種菌株是食品質(zhì)量安全控制中,非常典型的三種致病菌;鑒定卡 API 20E是在食品腸道致病菌檢測(cè)中廣泛應(yīng)用的鑒定卡。該鑒定卡是由 20個(gè)含干燥底物的小管所組成。這些測(cè)定管用細(xì)菌懸浮液接種。培養(yǎng)一定時(shí)間后,通過(guò)代謝作用產(chǎn)生顏色的變化,或是加入試劑後變色而觀察其結(jié)果。
試驗(yàn)流程如下:
(1)標(biāo)準(zhǔn)菌株培養(yǎng)后,挑取單菌落,加入 NaCl 0.85% 懸浮液中混勻成為菌懸液備用。
(2)用吸管將細(xì)菌懸液充滿檬酸CIT、VP各GEL管;其它管僅充滿管部(不是杯部)。
(3) ADH、LDC、URE、ODC和H2S,則用礦物油覆蓋。
(4)蓋上蓋子,孵育於35~37°C 18~24小時(shí)。
(5)在VP, TDA, IND中加入附加試劑。
(6)放入BIOMIC的抽屜里,進(jìn)行結(jié)果判讀。
試驗(yàn)注意事項(xiàng)包括:
(1)挑取純培養(yǎng)的單菌落。如有對(duì)于濃度有要求的鑒定卡,要用比濁儀檢測(cè)達(dá)到需要的濁度。
(2)在裝鑒定卡的塑料殼子內(nèi),加入適量水分保持濕度,避免培養(yǎng)時(shí)烘干。
(3)最好使用梅里埃的相關(guān)試劑,不要使用過(guò)期試劑。
(4)加樣時(shí)注意,充滿管部還是杯部。
(5)在使用前,所有附加試劑需達(dá)到室溫(20-30°C)。
(6)使用後,所有的安瓿,試驗(yàn)條和培養(yǎng)盒在處置之前都必須高壓滅菌,燒成灰或浸泡於殺菌劑中。
根據(jù)結(jié)果的圖像和數(shù)據(jù),進(jìn)行軟件調(diào)節(jié),按照上述方法再進(jìn)行一次質(zhì)控試驗(yàn),進(jìn)行結(jié)果
判讀,最后得到的結(jié)果如下:
沙門菌屬 Salmonella sp. 結(jié)果概率99.8 % 典型
(ONPG -) (ADH +) (LDC +/-) (ODC +) (CIT +) (H2S +) (URE -) (TDA -) (IND -) (VP -)
(GEL -) (GLU +) (MAN +) (INO +) (SOR +) (RHA +) (SAC -) (MEL -) (AMY -) (ARA +)

阪崎腸桿菌 Ent. Sakazakii 結(jié)果概率97.3 % 很典型
(ONPG +) (ADH +) (LDC -) (ODC +) (CIT +) (H2S -) (URE -) (TDA -) (IND -) (VP -)
(GEL -) (GLU +) (MAN +) (INO +) (SOR -) (RHA +) (SAC +) (MEL +) (AMY +) (ARA +)
?

大腸埃希菌 E. coli 結(jié)果概率99.6 % 很典型
(ONPG +) (ADH -) (LDC +) (ODC +) (CIT -) (H2S -) (URE -) (TDA -) (IND +) (VP -)
(GEL -) (GLU +) (MAN +) (INO -) (SOR +) (RHA +) (SAC +) (MEL +) (AMY -) (ARA +)
?

至此,質(zhì)控完畢,可進(jìn)行樣品檢測(cè)。
