?多重熒光免疫組化在器官移植排異反應(yīng)評估中的應(yīng)用分享：
多重熒光免疫組化技術(shù)（mIHC）利用酪氨信號放大技術(shù)（TSA），對不同抗原進行多輪次染色標記，可對單一切片進行至多六指標七色的染色，對于研究多種細胞之間的原位相互作用很有幫助，涉及到研究多細胞或多指標之間相互作用的領(lǐng)域都可以采用mIHC的技術(shù)替代傳統(tǒng)的IHC或IF，來獲得更高通量的研究結(jié)果。主要的應(yīng)用領(lǐng)域如下圖所示：
其中，大多數(shù)應(yīng)用mIHC的研究集中在腫瘤相關(guān)領(lǐng)域，腫瘤微環(huán)境及藥效評估方面應(yīng)用尤其多，之前的文章中小編也已經(jīng)為大家多次分享了相關(guān)應(yīng)用，感興趣的小伙伴們可以查閱之前的文章。
除了相對熱門的腫瘤領(lǐng)域可以用到mIHC來研究免疫細胞與腫瘤細胞之間的相互作用，其他領(lǐng)域也有很多特別優(yōu)秀的研究成果，今天小編就為大家分享一個mIHC在器官移植排異反應(yīng)評估中的應(yīng)用案例。
作者對45例腎臟移植患者的腎臟穿刺樣本進行評估，病例情況為：20例產(chǎn)生抗體介導(dǎo)的排異反應(yīng)（ABMR），20例產(chǎn)生T細胞介導(dǎo)的排異反應(yīng)（TCMR），5例無明顯排異反應(yīng)。多重熒光免疫組化結(jié)果如下圖所示，作者采用TSA原理的多重熒光免疫組化方法，對穿刺的腎臟組織，進行了NKp46、CD3、CD34和CD163的四標五色多染分析，可見清晰可見的結(jié)果。
接下來作者為驗證mIHC結(jié)果的可靠性，又分別進行了NKp46指標的IHC實驗以及CD3和CD163的RT-PCR實驗，結(jié)果如下圖顯示，mIHC所體現(xiàn)的信息與傳統(tǒng)IHC及RT-PCR方法一致性良好，表明mIHC方法提供的數(shù)據(jù)可靠且更直觀。
接下來，作者針對三組對腎臟移植表現(xiàn)不同反應(yīng)的病理樣本進行了細致的分析，發(fā)現(xiàn)CD34+的白細胞、CD3+T細胞，CD163+巨噬細胞和NKp46+NK細胞在兩種排異反應(yīng)病理樣本中顯著提高，且TCMR組樣本有更強烈的免疫細胞募集。
接下來作者又對這些募集來的白細胞的分布進行了更細致的分析，發(fā)現(xiàn)免疫細胞在血管外的分布更多，尤其是TCMR組。
相較于TCMR組募集的白細胞主要集中于血管外，ABMR組的白細胞則更多的分布在腎小球內(nèi)，這一結(jié)果也可以很好地被mIHC成像分析所發(fā)現(xiàn)。
除了組間的差異外，腎臟移植的排異反應(yīng)還有很強的個體差異性，如下圖所示。
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mIHC方法可以允許在一張切片上同時標記多種marker，可以原位的展現(xiàn)多種細胞之間的相互作用，在臨床科研和疾病診斷中都有很大的潛力，今天小編給大家分析的在腎臟移植排異反應(yīng)研究中的應(yīng)用就是如此，mIHC方法的應(yīng)用，幫助科學家發(fā)現(xiàn)更精細的免疫細胞募集區(qū)域，為探秘排異機制及臨床減輕排異反應(yīng)提供了更多可能性。今天的分享就到這了，感興趣的小伙伴們可以關(guān)注愛必信的多重熒光免疫組化試劑盒及實驗服務(wù)，相信看文章的你們也可以得到這樣漂亮實驗結(jié)果和好的實驗發(fā)現(xiàn)！
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- 單陽性細胞占有核細胞百分比，密度。
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組分信息： SuperNova系列染料（可選）、信號放大反應(yīng)液、鼠兔通用型或者抗兔抗鼠HRP標記二抗、抗熒光淬滅封片劑、DAPI
產(chǎn)品特點： 可快速完成最高六指標七色的熒光多標記； 染料經(jīng)過優(yōu)化處理，相比普通染料，強度更高，持續(xù)時間更長； 有組化經(jīng)驗即可操作，染色無需特殊儀器，提供詳細的protocol
| 貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
| abs50032 | 多重熒光免疫組化染色試劑盒(組合系列） | 100T |
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