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如何利用多色流式細胞術(shù)篩選活化T淋巴細胞

作者:上海雅吉生物科技有限公司 2021-04-19T09:57 (訪問量:9205)


T淋巴細胞是一種重要的免疫活性細胞,由一群功能不同的異質(zhì)性淋巴細胞組成,在胸腺內(nèi)分化成熟,在整個免疫應(yīng)答中處于中心環(huán)節(jié)。在T細胞發(fā)育不同階段,其細胞膜分子表達的種類和數(shù)量均不相同。譬如,初始T細胞胞體小,細胞質(zhì)少,表達CD45RA、CCR7、CD62L、CD127和CD132等,但不表達一些活化相關(guān)的標志物,例如CD25(晚期)、CD44、CD69、CD45RO或HLA-DR(較晚期)。因此T淋巴細胞在活化的不同階段細胞表面會表達不同的活化分子,它們是檢測T淋巴細胞是否被有效誘導活化的標準。

T淋巴細胞

1、細胞毒T細胞(cytotoxic T cell):消滅受感染的細胞。這些細胞的功能就像一個“殺手”或細胞毒素,因為它們可以對產(chǎn)生特殊抗原反應(yīng)的目標細胞進行殺滅。細胞毒T細胞的主要表面標志是CD8,也被稱為殺手T細胞。

2、輔助T細胞(helper T cell)在免疫反應(yīng)中扮演中間過程的角色:它可以增生擴散來激活其它類型的產(chǎn)生直接免疫反應(yīng)的免疫細胞。輔助T細胞的主要表面標志是CD4。 T細胞調(diào)控或“輔助”其它淋巴細胞發(fā)揮功能。

3、調(diào)節(jié)/抑制T細胞(regulatory/suppressor T cell):負責調(diào)節(jié)機體免疫反應(yīng)。通常起著維持自身耐受和避免免疫反應(yīng)過度損傷機體的重要作用。調(diào)節(jié)/抑制T細胞有很多種,目前研究最活躍的是CD25+ CD4+ T細胞。

4、記憶T細胞 (memory T cell):在再次免疫應(yīng)答中起重要作用。記憶T細胞由于暫時沒有非常特異的表面標志。

由此可知,T細胞及其亞群可以根據(jù)細胞表面表達的不同標志物而區(qū)分,如CD3,CD4,CD8和CD25等。使用這些結(jié)合了熒光的抗體直接標記這些標志物之后,多色流式分析技術(shù)就可以幫助研究者對單個細胞同時進行多個標志物的測量,而這可以提供特定樣品關(guān)于細胞系以及細胞亞群分化階段的信息。

流式細胞術(shù)研究專家exbio可提供活性T細胞篩選試劑盒,助您實現(xiàn)活性T細胞的免疫分型。

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活性T細胞篩選試劑盒
50tests 基于不同熒光標記的抗體CD45/CD8/CD4/PD-1/ HLA-DR/CD3/CXCR5/CD38對活化的T淋巴細胞亞群進行免疫表型分析

試劑盒中抗體信息:

CD試劑盒中抗體信息

活性T細胞篩選試劑盒

結(jié)果分析——新冠病毒患者外周血樣本分析:

新冠病毒患者外周血樣本分析

COVID-19患者中免疫細胞頻率動力學的事例。

上圖設(shè)門分析用于鑒定患者外周血中活化的細胞毒性CD8 + T淋巴細胞。下圖顯示了患者住院期間幾個時間點測得的細胞頻率(占T細胞的百分比)。

細胞毒性CD8 + T淋巴細胞

流式細胞術(shù)表型分析策略,用于鑒定正常人外周血中活化的T細胞。

1.單重態(tài)細胞

2.白細胞

3.淋巴細胞

4.CD3 + T淋巴細胞

5.CD4 +與CD8 + T淋巴細胞

下中部:活化的CD8 +細胞毒性T淋巴細胞

右下:循環(huán)的濾泡輔助性T淋巴細胞

右上:激活的CD4 +輔助/誘導T淋巴細胞

CD4 +與CD8 + T淋巴細胞

COVID-19患者中免疫細胞頻率動力學的示例。

上圖設(shè)門分析用于鑒定患者外周血中活化的輔助/誘導劑CD4 + T淋巴細胞。

下圖顯示了患者住院期間幾個時間點測得的細胞頻率(占T細胞的百分比)。

COVID-19患者中免疫細胞頻率動力學

需要住院的COVID-19患者中免疫細胞頻率動力學的示例。

上圖顯示了用于識別患者外周血中循環(huán)性T輔助濾泡細胞的設(shè)門策略。

下圖顯示了患者住院期間幾個時間點測得的細胞頻率(占T細胞的百分比)。

COVID-19患者中免疫細胞頻率動力學

使用ED7705 活性T細胞篩選試劑盒在正常人外周血中對活化的細胞毒性CD8 + T淋巴細胞(左),活化的輔助/誘導性CD4 + T淋巴細胞(中)和循環(huán)T輔助濾泡細胞(右)進行流式細胞儀表面染色。 圖顯示了每種細胞亞群的頻率(占T細胞的百分比)。

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