
? ? ? RNA提取的實驗步驟為:破碎組織一分離RNA一沉淀RNA一洗滌RNA一融解RNA一保存RNA。其中樣品細(xì)胞和組織的有效破碎更是在RNA提取的實驗過程中起到關(guān)鍵作用,前期細(xì)胞破碎的不完全,會導(dǎo)致后續(xù)實驗出現(xiàn)各種問題。本實驗使用了上海凈信的冷凍研磨儀來幫助人體宮頸樣品研磨后提取RNA。

冷凍研磨儀+2ml適配器+2ml研磨管若干+3mm和5mm鋼珠若干
實驗過程:
1、將儀器開機(jī)預(yù)冷,溫度設(shè)置為-20℃。
2、將提前剪碎的樣品及研磨珠放入2ml研磨管中,再根據(jù)實驗方法吸取核酸提取液Trizo。
3、等研磨儀主機(jī)溫度降到-20℃后,把適配器固定到研磨儀主機(jī)中。
4、設(shè)置運(yùn)行參數(shù)參考,65HZ,60S,研磨5次。

注意事項:
1.因?qū)m頸組織中結(jié)締組織較多,準(zhǔn)備樣品時可先將樣品提前剪碎。
2.實驗過程中需注意平面配平。
3.定期清理適配器及研磨珠,防止殘留的藥品或樣品對其造 成腐蝕(清洗研磨珠時需要先用75%的酒精進(jìn)行浸泡4小時,浸泡完成后再用高壓滅菌鍋進(jìn)行滅菌處理,最后用超聲波清洗機(jī)進(jìn)行清洗。)??
4.研磨完畢后需關(guān)閉電源,將安全鎖歸位。
? ? ? 細(xì)胞或組織的徹底勻漿對RNA提取來說,是一個很關(guān)鍵的步驟。上海凈信冷凍研磨儀能夠有效防止RNA的損失和降解,保留蛋白活性。研磨時處于封閉狀態(tài),無交叉污染,具備安全罩及安全鎖,無需涉及液氮,安全性高。
