?大家好,小編又又又來了。今天是WB最后一步了,抗體孵育到顯影過程。 ? 01 一抗孵育 ◆?封閉結(jié)束前20min準備和所需一抗數(shù)量相等的孵育盒,在孵育盒上用記號筆標注出抗體編號及所需稀釋比。按照規(guī)定的稀釋比例進行抗體稀釋。稀釋比例建議預(yù)實驗提前摸索或者根據(jù)抗體說明書上建議。 ◆?封閉時間結(jié)束之后,倒掉封閉液,將稀釋好的抗體加入到槽內(nèi),將搖床放入4℃展示柜孵育過夜。 ◆?第二天將搖床搬出,平衡室溫搖15min,倒掉一抗工作液,加入5mL TBST潤洗膜一次,倒掉,加新的TBST洗膜5min,倒掉TBST,重復(fù)5次,此過程在搖床上進行。 ? 02 二抗孵育 ◆?在洗膜的過程中稀釋二抗,確定好一抗的物種來源,選擇相應(yīng)的二抗進行稀釋,稀釋液為1xTBST。 ◆?洗膜結(jié)束,倒掉TBST,盡量使孵育盒內(nèi)無殘留液體。然后加入二抗稀釋液,孵育60min,此過程在搖床上進行。 ◆?二抗孵育60min后,加入5mL TBST洗膜,“SPEED”檔位調(diào)到50-60,洗膜5min,倒掉TBST,重復(fù)5次。 ? 03 顯影 按照膜的大小,配置ECL發(fā)光液體積,將發(fā)光液放在PE手套上,充分混勻。將膜從孵育盒中夾出,用紙沾干,放入發(fā)光液中5秒后用紙沾干,放入成像儀中曝光成像。 ? 索萊寶相關(guān)產(chǎn)品 產(chǎn)品貨號 產(chǎn)品名稱 10×麗春紅 膜封閉液 抗體稀釋液 一抗稀釋液? HRP標記抗體稀釋液 AP標記抗體稀釋液 熒光抗體稀釋液 1×TBST Western blotting (小鼠IgG)ECL顯色試劑盒 Western blotting (兔IgG)ECL顯色試劑盒 Western blotting (山羊IgG)ECL顯色試劑盒 Western blotting (小鼠/兔IgG) ECL顯色試劑盒 ? 地 址: 北京市北京經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)環(huán)科中路16號26幢3層301 聯(lián)系人: 索萊寶-龔思雨 電 話: 010-50973130 傳 真: Email:3193328036@qq.com
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作者:北京索萊寶科技有限公司 2021-05-11T00:00 (訪問量:4685)
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