腺病毒上清感染使用說明書-其它資料-資訊-生物在線

?腺病毒病毒上清感染細胞的方案

第一天? 目的細胞鋪板(以24孔板為例)

將細胞狀態良好的目的細胞(293T細胞為例)，用0.25%胰酶消化下來，把細胞濃度調整為3.0*10⁵cells/孔接種于24孔板，按500ul/孔培養基加入。

接種目的細胞的數量因細胞生長速度而有所不同，一般保證在第二天進行病毒感染時細胞匯合度達到90%～95%之間為宜。

第二天? 病毒感染

1 計算所要添加的病毒量

V（ml）=MOI*細胞數量/病毒滴度

以MOI=5，細胞數為3.0*10⁵cells，病毒的滴度1.5*10⁸ifu/ml為例

所需要加的病毒的體積為：

V=5*3.0*10⁵cells/1.5*10⁸

^??= 1*10^-2ml

備注：如果所加的病毒量低于2.0ul時，則需要稀釋病毒原液后，再加病毒液體。

2 病毒感染

取出24孔板中舊培養基，加入無血清的含有所需要病毒量的培養基500ul（400ul+100ul稀釋的病毒液體）。

3 換液

感染實驗同一天，2h后，棄去上清，換成10%血清的培養基，500ul/孔。

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