??重組胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅)?(Recombinant Trypsin-EDTA Solution with Phenol Red),也稱重組胰蛋白酶細(xì)胞消化液(含酚紅),是一種不含動物源性物質(zhì)的(animal origin-free, AOF)的含酚紅的即用型重組胰酶細(xì)胞消化液。
本產(chǎn)品經(jīng)過過濾除菌處理,含酚紅和0.02% EDTA,pH值為7.2-7.8,不僅可以和普通的胰酶細(xì)胞消化液一樣直接用于培養(yǎng)細(xì)胞或一些組織的消化,更適合用于一些嚴(yán)格要求使用無動物源性胰酶消化液的細(xì)胞或組織的消化。
胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶,可特異切割賴氨酸及精氨酸C末端肽鍵。本產(chǎn)品使用的是重組豬胰蛋白酶,由大腸桿菌表達(dá)純化獲得。本產(chǎn)品中所使用的重組豬胰蛋白酶具有與動物源性豬胰蛋白酶相同的酶學(xué)性質(zhì),可替代豬胰腺來源胰蛋白酶應(yīng)用于細(xì)胞和組織的消化等用途。
本產(chǎn)品使用的重組豬胰蛋白酶符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。本產(chǎn)品使用的是符合2020版中國藥典中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的重組胰蛋白酶。
本產(chǎn)品使用的重組豬胰蛋白酶無動物源性。重組生產(chǎn),無動物源性的病毒污染,生產(chǎn)過程不使用任何動物源性原料。宿主蛋白殘留量和DNA殘留量都符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。傳統(tǒng)胰酶大多取自豬、牛的胰臟,胰臟中除了胰蛋白酶,還含有多種其它的蛋白酶,而且傳統(tǒng)胰酶生產(chǎn)工藝的特點(diǎn)決定了胰酶中不可避免地含有動物來源的其它雜質(zhì)。
本產(chǎn)品使用的重組豬胰蛋白酶純度高。通過親和層析等多個純化步驟獲得的高純度重組豬胰蛋白酶,酶比活高。
本產(chǎn)品的消化效果好。相同條件下,本消化液中的酶活性比含0.05%胰酶的胰酶細(xì)胞消化液要高約2倍,對于多數(shù)細(xì)胞的消化效果也更好。
本重組胰酶細(xì)胞消化液使用便捷,通常室溫消化1-3分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。使用本產(chǎn)品消化細(xì)胞的效果參考圖1。通常在細(xì)胞出現(xiàn)明顯的輕微形態(tài)變化,并且細(xì)胞并未完全變圓時(shí),即可吹打下細(xì)胞。
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圖1. 重組胰酶細(xì)胞消化液消化不同細(xì)胞的效果圖。用重組胰酶細(xì)胞消化液分別消化A549、MHCC97H、QSG-7701細(xì)胞,在1-2分鐘內(nèi),顯微鏡下可觀察到細(xì)胞邊緣明顯收縮,緊密貼合的細(xì)胞離散成單個細(xì)胞。注:本實(shí)驗(yàn)中,胰酶消化液室溫放置10分鐘左右,未經(jīng)預(yù)熱;細(xì)胞未經(jīng)PBS洗滌,在吸凈細(xì)胞培養(yǎng)液后直接加入適量胰酶消化液在約25℃室溫進(jìn)行消化,如果用PBS或HBSS等洗滌細(xì)胞用于去除殘余的血清,消化效果會更好。實(shí)際效果會因細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)條件的不同而略有差異,本圖僅供參考。
包裝清單:
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
| 100ml | 重組胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅) | 100ml |
| 500ml | 重組胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅) | 500ml |
| - | 說明書 | 1份 |
保存條件:
4℃保存,一年有效。短期內(nèi)不使用,可以-20℃保存,-20℃可以保存更長時(shí)間。
注意事項(xiàng):
本產(chǎn)品從4℃取出后可直接用于細(xì)胞的消化。對于較難消化的細(xì)胞或需要快速消化的情況,在加入本消化液后,可將培養(yǎng)器皿置于37℃溫育1-3分鐘。
不建議直接將本產(chǎn)品置于37℃預(yù)溫育,否則胰酶的活力會有一定的損失。
在使用本產(chǎn)品的過程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。
本重組胰酶細(xì)胞消化液如果在-20℃保存,解凍后可以在4℃保存。雖然經(jīng)測試,反復(fù)凍融5次對酶活幾乎沒影響,但還是需要盡量避免反復(fù)凍融。
消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長,須避免消化過度,否則細(xì)胞接種后生長狀況會較差。本產(chǎn)品對于很多細(xì)胞,會比含0.05%胰酶的胰酶細(xì)胞消化液的消化速度更快,需要注意避免消化過度。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
