DAB顯色試劑盒（20×）說明-分析方法-資訊-生物在線

DAB顯色試劑盒（20×）說明

作者：北京索萊寶科技有限公司 2016-04-26T00:00 (訪問量:9003)

DAB顯色試劑盒（20×）說明書

貨號：DA1010

規(guī)格： ???????

?	DA1010-3	DA1010-10?
溶液 A	3ml	10ml?
溶液 B	3ml	10ml

保存：???-20℃避光密閉保存，一年有效，避免反復凍融；短期可2-8℃保存。產(chǎn)品簡介：???二氨基聯(lián)苯胺（Diaminobenzidine,DAB）是過氧化物酶（POD）的顯色底物，DAB顯色液主要用于免疫過氧化物酶法，適用于辣根過氧化物酶HRP標記的免疫印記或免疫組化反應。過氧化物酶催化底物發(fā)生反應，于反應部位產(chǎn)生棕色沉淀物，免疫印記可直接在膜上顯示條帶；免疫組化標本顯色時間一般為室溫5-20分鐘，隨后在顯微鏡下觀察顯**況，顯色充分后應將標本及時脫水封固，其終產(chǎn)物可直接在光鏡下觀察，也可經(jīng)OsO4處理后，增加反應產(chǎn)物的電子密度，用于電鏡觀察。操作說明：

1.?對于組織切片或蛋白質(zhì)印記膜，在與辣根過氧化物酶（HRP）標記的抗體或其它形式的探針孵育后，用適當洗滌液洗滌3-5次，每次3-5分鐘。

2.?取900μl PBS（或雙蒸水），加入50μl 溶液A，50μl 溶液B混合均勻，即配成DAB工作液。

如需要更大體積工作液，可按比例放大。此溶液必須現(xiàn)用現(xiàn)配，配好后避光保存，1小時內(nèi)使用，過期后請將剩余的液體廢棄。

3.?向組織切片或印記膜上加入適量DAB工作液，確保能充分覆蓋樣品。

4.?室溫避光孵育3-10 分鐘或更長時間，避免光照，直至顯色至預期深淺。

5.?去除DAB染色工作液，用蒸餾水洗滌2-3次即可終止顯色反應。

6.?對于組織切片或細胞樣品，顯色反應終止后，可對其進行其他染料復染。對于膜，顯色反應終止后，可以室溫晾干避光保存。

注意事項：

1.?DAB溶液應低溫密封保存。如有結晶析出，應確保結晶完全溶解再行使用。

2.?顯色工作液應現(xiàn)用現(xiàn)配，新鮮配制的工作液應為無色或淺棕色，如顏色過深，請勿使用。

3.?顯色時間嚴格控制，根據(jù)情況調(diào)整，以免顯色過度。固相膜顯色數(shù)小時后即會褪色，不能永久存在。

4.?DAB為可疑致癌物，請采取必要的防范措施。操作時應戴手套，盡量避免與皮膚接觸，用后及時徹底沖洗，接觸DAB的實驗用品最好經(jīng)洗液浸泡24h后使用。

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